【摘 要】
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硝基苯并呋咱(NBD)是苯并呋咱的7-位被硝基取代的杂环分子,当其4位连接一个给电子基团时,整个化合物自身会形成电子推拉效应,发射出荧光,因此在探针设计中常被作为经典的荧光团
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硝基苯并呋咱(NBD)是苯并呋咱的7-位被硝基取代的杂环分子,当其4位连接一个给电子基团时,整个化合物自身会形成电子推拉效应,发射出荧光,因此在探针设计中常被作为经典的荧光团。含硫的生物小分子包括硫化氢(H2S)和生物硫醇(RSH)在生理活动过程中起着重要作用。因此,本论文基于NBD构建了三种用于检测H2S/RSH的荧光探针。第一章本章主要对NBD在荧光探针领域的研究进展作了综述。首先对苯并呋咱(BD)及其衍生物NBD的结构和性质进行了概述;其次,从检测对象和检测机理的角度,对近年来基于NBD的荧光探针的研究作了重点介绍;最后,基于此提出了本论文的立题背景、研究内容和创新性。第二章本章将苯并噻唑与硝基苯并呋咱(NBD)通过硫醚键连接合成了可区分小分子生物硫醇的荧光探针TBT-NBD。TBT-NBD通过Cys/Hcy诱导并重排产生相应的NBD胺基衍生物,而GSH仅诱导取代反应并产生相应的NBD巯基衍生物。NBD胺基衍生物在551 nm发射较强的荧光,可将Cys/Hcy和GSH区分开。探针TBT-NBD能对Cys/Hcy的识别选择性好,检测限低(分别为12.6 nM和20.4 nM),且响应时间短(5 min),另外,TBT-NBD也成功用于SNU-423细胞成像来测定细胞内源和外源的Cys/Hcy。第三章本章以对硝基苯甲酸和NBD哌嗪衍生物通过缩合构建了探针NA-NBD。探针为NBD胺基衍生物,其本身发射黄绿色荧光,与H2S能发生特异性C-N键裂解反应,反应后变成NBD巯基衍生物,NBD巯基衍生物几乎不发射荧光,溶液具有独特的粉红色。因此可以从荧光猝灭和溶液颜色变化(浅黄色变为粉红色)两个方面实现对H2S的检测。NA-NBD对H2S的检测选择性好、灵敏度高,其线性范围在0-50?(44),检出限可达3.07?(44)。第四章在第三章研究的基础上,将三苯胺羧酸通过哌嗪环与NBD缩合制备了一种新型的荧光探针TPA-NBD。TPA-NBD和H2S反应发生C-N键裂解反应后,生成三苯胺酰胺化合物和NBD巯基衍生物,三苯胺酰胺化合物使荧光增强,而NBD巯基衍生物使荧光减弱,在两个不同激发波长下都能对H2S选择性响应,显示不同的荧光特性。探针TPA-NBD在两个不同的通道都对H2S的响应具有较高的灵敏度,检出限可低达0.70?M,且线性范围宽(0-125?(44)),并且双通道同时检测比单激发单发射检测的结果更准确可靠。
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