高频电针对心肌缺血大鼠内关、阳陵泉和非穴区血流/NE/α1-AR/β2-AR影响的研究

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经穴-脏腑相关是针灸理论的核心内容之一,一直是针灸领域关注的热点。其中经穴的效应性是指导针灸临床选穴治疗的理论依据,大量研究显示针灸可通过多种途径和机制对脏腑起调节作用。而经穴的反映性有助于中医临床诊断,目前其研究主要集中在机体处于生理状态、病理状态及生理状态下针刺干预后经穴的反映情况,而研究病理状态下针刺干预后经穴反映情况的较少。其中穴区微循环血流灌注量的研究近年来备受关注。微循环血流灌注量是研究微循环的重要参数之一,可大致反应一种疗法的作用机理和疗效。现代研究显示高频电针内关穴对改善心肌缺血损伤有积极作用,但高频电针“内关”穴对心肌缺血损伤大鼠相关经穴皮肤微循环血流灌注量的影响尚不清楚,因此本研究应用激光散斑血流成像技术观察高频电针“内关”穴对心肌缺血损伤大鼠“内关”穴、“阳陵泉”穴和非穴区微循环血流灌注量的影响,探讨经穴-脏腑相关的规律。并利用ELISA技术检测各穴区皮肤组织中去甲肾上腺素(NE)及其受体α1肾上腺素能受体(α1-AR)和β2肾上腺素能受体(β2-AR)蛋白表达情况。从交感神经的角度阐释高频电针“内关”穴对心肌缺血损伤大鼠相关经穴皮肤组织分子响应的影响。目的:(1)应用激光散斑血流成像技术,分别于电针治疗1次和电针治疗3次后,纵向对比观察心肌处于正常生理态、心肌缺血损伤病理态及高频电针经穴干预态和高频电针非穴干预态时“内关”穴、“阳陵泉”穴和非穴区微循环血流灌注量的差异,同时横向对比在心肌处于同一状态时电针治疗1次和电针治疗3次后“内关”穴、“阳陵泉”穴及非穴区微循环血流灌注量的差异;探寻心肌处于不同状态时相关经穴微循环血流灌注量的变化规律及高频电针经穴对心肌缺血损伤大鼠相关经穴微循环血流灌注量的影响。(2)利用ELISA技术,对比观察电针治疗1次和电针治疗3次后心肌处于不同状态时各穴区皮肤组织去甲肾上腺素(NE)及其受体α1肾上腺素能受体(α1-AR)和β2肾上腺素能受体(β2-AR)蛋白的表达情况。阐释心肌处于不同状态时相关经穴分子的响应情况。方法:雄性Wistar大鼠60只随机分为:正常组、假手术组、心肌缺血损伤组(即模型组)、高频电针经穴组和高频电针非穴组。每组12只,每组根据治疗次数分为电针治疗1次组和电针治疗3次组,每组6只。高频电针经穴组和高频电针非穴组在模型成功制备的基础上给予电针治疗。于第1天和第3天电针治疗结束后,应用激光散斑血流成像技术检测“内关”穴、“阳陵泉”穴及非穴区微循环血流灌注量。待检测完血流灌注量后,依次腹主动脉取血,并取各穴区皮肤组织,皮肤组织大小约0.3cm×0.1cm×0.1cm。各穴区皮肤组织应用ELISA技术检测NE、α1-AR和β2-AR的蛋白表达。结果:(1)电针治疗1次和电针治疗3次后纵向比较:与正常组比较,模型组“内关”穴区微循环血流灌注量显著降低(P<0.05)。与模型组比较,高频电针经穴组“内关”穴区微循环血流灌注量显著升高(P<0.05),高频电针非穴组“内关”穴区微循环血流灌注量差异无统计学意义。纵向对比各组“阳陵泉”穴和非穴区微循环血流灌注量差异无统计学意义(P>0.05)。心肌处于同一状态时治疗1次与治疗3次后的横向比较:各组“内关”穴、“阳陵泉”穴和非穴区微循环血流灌注量差异无统计学意义,但是“内关”穴和“阳陵泉”穴区微循环血流灌注量较非穴区偏高,“内关”穴区微循环血流灌注量在心肌处于不同状态时变化最显著。(2)电针治疗1次和电针治疗3次后纵向比较:与正常组比较,治疗1次和治疗3次模型组“内关”穴区NE、α1-AR表达上调,β2-AR表达下调(P<0.05),与模型组比较,治疗1次和治疗3次高频电针经穴组“内关”穴区NE、α1-AR表达下调,β2-AR表达上调(P<0.05),高频电针非穴组“内关”穴区NE、α1-AR、β2-AR蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),纵向对比各组“阳陵泉”穴和非穴区皮肤组织NE、α1-AR、β2-AR蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)心肌处于不同状态时“内关”穴区微循环血流灌注量的变化有一定的规律性,提示“内关”穴区微循环血流灌注量与心脏的生理功能及病理变化密切相关,能反映心肌的状态。高频电针“内关”穴对心肌缺血损伤大鼠“内关”穴区微循环血流灌注量有调节作用。(2)心肌处于不同状态时,“内关”穴区NE、α1-AR和β2-AR蛋白含量的变化有一定的规律性,结合穴区微循环血流灌注量的变化规律,提示“内关”穴区微循环血流灌注量的变化可能与“内关”穴区NE、α1-AR和β2-AR的表达相关,说明交感神经相关物质可能是“内关”穴区微循环血流灌注量变化的机制之一。
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