目前,小分子荧光传感器是化学、生命科学和临床医学等学科及其交叉学科的研究热点,这是因为小分子荧光传感器具有合成过程简便、成本低廉、能实现识别手段多样化等优点。而且研究人员在利用生物荧光传感器进行测试过程中操作容易,样品不需要进行繁琐的预处理,能对被检测物进行实时原位监测,同时可以很容易穿透细胞,可以实现对手术前后癌细胞和患癌组织进行成像跟踪,因此具有很好的生物应用前景。本文通过设计合成两种基于分子内电荷转移机制(ICT)的萘酰亚胺类荧光探针,分别实现了对人体生物酶和小分子活性氮(RNS)的定量检测。(1)我们通过合理设计,合成了一种基于分子内电荷转移(ICT)机制的糜蛋白酶(CHT)荧光探针。该探针以1,8-萘酰亚胺作荧光母体,引入4-溴丁醜基构建了比率荧光探针NI-1。4-溴丁酰基有着双重功能:模拟多肽的底物识别糜蛋白酶和减弱荧光团的ICT效应。当引入4-溴丁酰基后,探针分子中的羟基被保护起来,减弱了 ICT效应,荧光发射在450 nm处,当存在糜蛋白酶时,酶催化裂解酯键,释放出荧光团上的羟基,荧光发射红移至550 nm,发出强烈荧光,显著改变了探针的光物理特性,具有较大的Stokes位移,从而实现在生理环境下CHT的比率检测,并获得了较低的检测限,对CHT的检测限为8.4 ng/mL。探针也成功应用于抑制剂表征,为筛选其他糜蛋白酶抑制剂提供了更有希望的应用前景。目前未见利用比率型荧光探针检测CHT的报道,该探针的设计与合成为CHT的检测提供了新的途径。(2)我们构建了一种新型荧光探针检测ONOO-,在1,8-萘酰亚胺的荧光骨架中引入α-酮酰胺作为识别基团构建了“turn on”型荧光探针NI-2。探针引入α-酮酰胺后,ICT效应被抑制,因而荧光很弱,与ONOO-反应后,NI-2释放出强荧光的氨基萘酰亚胺,改变了探针的光物理特性,具有较大的Stokes位移。NI-2对ONOO-表现出高灵敏度和选择性。实现了在生理环境下对ONOO-的检测。