鸡Tie-2受体胞外段重组蛋白质疫苗抗小鼠肿瘤免疫治疗实验研究

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近年的研究表明Tie-2(tyrosine kinase with immunoglobulin-like and epidermal growth factor homology domains,又称作TEK)受体在肿瘤发生发展过程中参与调节血管结构稳定性,促使肿瘤血管发芽,促进血管延长和肿瘤血管与供体血管间形成联系,且在肿瘤组织的血管内皮细胞高表达,部分对阻断VEGF途径无生物反应的肿瘤常表达Tie-2,因此Tie-2受体是部分肿瘤血管化的主要信息途径。许多学者开始尝试以Tie-2受体作为肿瘤血管靶向治疗的靶点。我们利用异种同源的鸡Tie-2受体胞外片段重组蛋白(chTie-2)作为疫苗来诱导其在小鼠体内产生的免疫反应,通过异种Tie-2受体与自身Tie-2受体产生交叉反应来打破免疫耐受,从而有望通过这种自身免疫反应阻止肿瘤血管生成,抑制肿瘤的生长。同时我们用小鼠自身Tie-2受体相应片段(mTie-2)的重组蛋白作为同种对照。实验结果发现,经chTie-2免疫的小鼠能明显减缓肿瘤的生长并延长荷瘤小鼠的生存时间。Western blot和ELISA检测都发现chTie-2免疫小鼠血清中产生的抗体不仅能识别chTie-2,而且能识别同种的重组蛋白质mTie-2;免疫荧光检测也证实在chTie-2免疫小鼠肿瘤组织内有内皮细胞性自身抗体沉着。ELISPOT显示chTie-2免疫后小鼠脾脏中有抗chTie-2和mTie-2抗体分泌细胞的产生。在阻断CD4~+淋巴细胞亚群后,chTie-2免疫后的小鼠不能产生自身抗体。从chTie-2免疫小鼠血清中纯化的免疫球蛋白也能产生抗肿瘤作用且在体外能诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的调亡。小鼠肿瘤内微血管的CD31免疫组化结果表明
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