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目的:①对脑瘫双生子、脑瘫单产儿进行病证结合调查,分析在小儿脑瘫中存在的高危因素及证候分布特点。②基于450k甲基化芯片技术筛选证候差异同卵双生子、正常-脑瘫单胎儿的差异甲基化位点,从微观的基因水平探讨脑瘫的分子机制。方法:①脑瘫的理论研究:通过CNKI数据库分析近40年国内脑瘫研究现状,并从双生子入手,探讨采用双生子材料用病证结合方法研究脑瘫的优势和意义。②脑瘫的病证结合研究:采用小儿脑瘫病因学临床调查表、小儿脑瘫中医证候调查问卷表和专家诊断对所筛选的脑瘫双生子和脑瘫单胎儿进行一般情况和证候的调查,探讨分析脑瘫的病因、危险因素及证候分布等。③ 脑瘫的甲基化研究:采用HumanMethylation450BeadChip(450k甲基化芯片)技术对2对“正常-脑瘫”双生子、7例脑瘫单产儿和1例健康儿进行全血DNA甲基化谱扫描,并筛选双生子间、对1双生子-正常单胎儿、对2双生子-正常单胎儿、对1双生子-脑瘫单胎儿、对2双生子-脑瘫单胎儿、正常单胎儿-脑瘫单胎儿的差异甲基化位点,利用GO、KEGG数据库对差异甲基化位点进行分析。结果:①病证结合调查结果:脑瘫患儿的危险因素依次是产前孕母因素、易惊纳差、低出生体重、早产、缺氧等;在纳入研究的120例脑瘫患儿中,有108例脑瘫患儿调查的危险因素在两种及以上;证候调查结果以脾、肾亏虚为主;双生子间存在病情轻重程度的差异。②脑瘫患儿甲基化谱研究结果:通过GO、KEGG数据库分析,脑瘫的发生涉及大量的甲基化位点异常表达,差异甲基化位点由KEGG数据库注释的结果多集中于免疫相关通路,由GO数据库功能注释的结果在生物学过程多于免疫和神经发育类相关,在细胞组份多于运输机制相关,在分子功能多与酶活性有关。结论:①脾、肾亏虚在脑瘫的证候中占主导地位。②脑瘫致病因素复杂,危险因素多在两种及以上,严重程度不一。③脑瘫患儿间尤其是同卵双生子间MZ间的病因、证候差异越大,其差异甲基化位点数目也越多。④脑瘫的发生涉及大量的甲基化位点异常表达,尤其是与免疫相关通路的基因甲基化存在异常。