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胶质细胞系源性神经营养因子（GDNF）是迄今所知对中脑黑质致密部(SNc)多巴胺（DA）能神经细胞起特异性保护和促存活作用最强的神经营养因子。过去证实DA 能神经元中存在NF-κB 非经典信号通路，并且GDNF 能够激活该通路。为了进一步探索NF-κB 非经典信号通路是否介导GDNF 对DA 能神经细胞的保护作用，是否通过影响Bcl-2 家族蛋白的表达而实现其保护作用。本研究以MN9D 细胞（一种由胚胎小鼠中脑顶盖DA 能神经细胞和N18TG2 神经母细胞瘤细胞融合而成的细胞系，表现出中脑DA能神经细胞的明显特征）为研究对象，采用Hoechst33258 核染色和流式细胞仪方法检测细胞凋亡率。应用In-cell western Assay 分析MN9D 细胞中目的蛋白的表达水平。结果显示，MN9D 细胞凋亡率随6-hydroxydopamine（6-OHDA）作用浓度的增加而增加，200μM 的6-OHDA 作用30 分钟后24小时可导致38％的细胞凋亡。在6-OHDA 损伤前两小时给予GDNF（50ng/ml）
预处理，可使MN9D 细胞的凋亡率从38％降低至16％。而在阻断NF-κB 非经典信号通路后，GDNF 降低细胞凋亡率的作用减弱。同时In-cell westernAssay 的结果也显示，不管是阻断还是不阻断NF-κB 非经典信号通路，GDNF 对正常的MN9D 细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-w 和促凋亡蛋白Bad、Bax 的表达均没有明显的影响。而在损伤的MN9D 细胞中，不阻断NF-κB 非经典信号通路的情况下，GDNF 预处理能够上调Bcl-2、Bcl-w 及下调Bad、Bax 蛋白的表达。而在阻断了NF-κB 非经典信号通路后，GDNF 上调Bcl-2、Bcl-w 表达的作用减弱，尤其对Bcl-2 的作用更为明显。而对GDNF 下调Bad、Bax 蛋白表达的作用没有明显的影响。因此，这些结果说明，GDNF 能够保护受损的MN9D 细胞，并且NF-κB非经典信号通路参与介导这一神经保护作用，该通路介导GDNF 上调受损MN9D细胞中Bcl-2、Bcl-w 两种促存活蛋白的表达，而对Bad 和Bax 蛋白的表达似乎没有明显影响。