目前获得性免疫缺陷综合症(AIDS)已成为严重威胁全人类健康的传染病之一。高效抗逆转录病毒疗法(HAART)能够抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)复制,延缓疾病进程,是至今为止最有效的控制和治疗AIDS的方法。既往研究结果表明特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在控制人HIV复制中起关键作用,但该领域的研究主要是针对未接受HAART的HIV-1感染者,而有关HAART对HIV-1特异性CTL免疫应答的影响的国内外研究报道很少,研究HAART对特异性CTL免疫应答的影响对于了解HAART后感染者体内的细胞免疫功能状态及探讨免疫功能重建的内在机理具有十分重要的意义。以往研究已经明确人类白细胞抗原(HLA)-I等位基因影响HIV-1特异性CTL应答及其疾病进展,但是这些研究资料都以非中国人为研究主体的研究结果,国内尚未见此方面研究报道。而不同人群其HLA-I等位基因频率表现出丰富的多态性,中国人群HLA-I等位基因的分布频率明显不同其它种族。因此对我国人群进行HLA-I等位基因频率与特异性CTL免疫应答相关性的研究十分必要,这不仅可以了解中国HIV-1感染者的特异性CTL应答频率与HLA-I多态性的相关性,同时还可发现影响HIV-1特异性CTL应答频率和疾病进展的特异性HLA-I等位基因。本研究以中国广东地区的HIV-1感染者为研究对象,采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)技术,以HIV-1 P24区域的氨基酸序列人工合成的12个重叠肽段组成的肽段库作为特异性肽段表位,刺激16例未接受HAART治疗和84例接受HAART治疗的HIV-1感染者外周血单个核细胞(PBMC),检测γ-干扰素(IFN-γ)分泌细胞频率,分析特异性CTL免疫应答水平,并用PCR-SSP方法检测所有感染者HLA-I类等位基因分型,研究HAART和HLA-I类等位基因对HIV-1特异性CTL免疫应答的影响。主要研究内容和结果如下:1.检测100例HIV-1感染者特异性CTL免疫应答水平后发现,48例感染者的PBMC能够识别HIV-1肽段表位并产生免疫应答,52例感染者不能识别HIV-1肽段表位且未产生免疫应答,应答组CD4+T细胞计数大于无应答组(P=0.01)。2.将HIV-1感染者按照HAART治疗时间分为未治疗组、治疗时间小于12个月组和治疗时间大于12个月组。对这三组的特异性CTL免疫应答强度进行比较发现,治疗时间大于12个月组的CTL应答强度明显大于治疗时间小于12个月组和未治疗组(P=0.048;P=0.027);进一步对这三组的CD4+ T细胞数进行检测发现,治疗时间大于12个月组的CD4+T细胞数明显大于治疗时间小于12个月组(P=0.0003)。3.不管HAART治疗与否,将HIV-1感染者按照CD4+T细胞计数分为CD4+T细胞数<200 cell /μL组,CD4+T细胞数200～350 cell/μL组,CD4+T细胞数>350 cell /μL组。其中CD4+T细胞数<200 cell /μL组特异性CTL阳性应答率为19.4%(6/31),CD4+T细胞数200～350 cell /μL组特异性CTL阳性应答率为61.8%(21/34),CD4+T细胞数>350 cell /μL组特异性CTL阳性应答率为60.0%(21/35)。对这三组特异性CTL阳性应答率进行比较发现,CD4+T细胞数<200 cell /μL组特异性CTL阳性应答率明显低于CD4+T细胞数200～350 cell /μL组、CD4+T细胞数>350 cell /μL组(P=0.001;P=0.001)。对三组HIV-1感染者的CTL应答强度进行比较发现,CD4+T细胞数<200 cell /μL组的特异性CTL应答强度显著低于CD4+T细胞数200～350 cell /μL组、CD4+T细胞数>350 cell /μL组(P=0.0003;P=0.009)。对三组HIV-1感染者血浆病毒载量的检测发现,三组病毒载量之间具有统计学差异(P=0.005),其中CD4+T细胞<200 cell /μL的感染组病毒量大于其它两组(P=0.004;P=0.009)。4.对入选的所有HIV-1感染者进行HLA-I类等位基因检测发现,具有不同HLA-I类等位基因的HIV-1感染者对于HIV-1肽段表位的免疫应答反应不同。HLA-A等位基因中阳性应答最高的为不常见基因(57.1%),其次为HLA-A*33(55.0%)和HLA-A*11(50.8%);HLA-B等位基因中阳性应答最高的为HLA-B*5(861.9%),其次为HLA-B*40(54.2%)和不常见等位基因(53.8%);HLA-C等位基因中阳性应答依次为HLA-Cw07(52.8%),HLA-Cw*03(50%),HLA-Cw*01(45%)。5.HIV-1感染者中,携带HLA-B*18、-B*40和-B*58基因型的感染者特异性CTL免疫应答强,以HLA-B*18/ B*40杂合状态的感染者更为明显;HLA-B*58特异性CTL应答强度和阳性应答率明显高于HLA-B*51(P=0.041;P=0.031)。表达不常见HLA-A等位基因的感染者和表达HLA-A*11、-A*33的感染者之间尽管特异性CTL阳性应答率和应答强度无差异,但是CD4+T细胞数有统计学意义(P=0.027;P=0.019)。结论1、如果不考虑HAART治疗因素的影响,血中CD4+T细胞数越高,HIV-1抗原特异性CTL免疫应答越强,二者呈正相关。2、HAART治疗能提升HIV-1感染者的特异性CTL免疫应答,延长治疗时间至一年以上更有助于改善特异性CTL免疫应答。3、HIV-1病毒载量较低的HIV-1感染者拥有较强的特异性CTL免疫应答。4、在我们研究的HIV-1感染者中,HLA-I等位基因分布频率较高的为HLA-A*11(0.59),HLA-A*02(0.53),HLA-Cw*03(0.50),HLA-Cw*01(0.40),HLA-B*46(0.35)。HLA-B等位基因型别比HLA-A、HLA-Cw等位基因更复杂多样。5、HIV-1感染者的特异性CTL免疫应答似乎与HLA-A、B、Cw等位基因分布频率无关;拥有不同HLA-B基因型的HIV-1感染者的特异性CTL免疫应答存在显著性差异,而对于HLA-A基因型和HLA-Cw基因型未发现此现象。表明HLA-B等位基因对HIV-1特异性CTL免疫应答影响最大。6、HLA-B*58、HLA-B*40、HLA-B*18基因型,可能是HIV-1肽段表位的限制性HLA-I位点,我们首次发现HLA-B*40/B*18杂合状态的感染者特异性CTL对HIV-1表位的免疫应答可能更具有优势。