【摘 要】
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目的 本研究的目的是探索体内外骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）定向诱导分化为神经细胞的可行性,观察BMSCs对大鼠急性脊髓损伤神经功能恢复的影响。
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目的 本研究的目的是探索体内外骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）定向诱导分化为神经细胞的可行性,观察BMSCs对大鼠急性脊髓损伤神经功能恢复的影响。 实验材料与方法 实验动物:Wistar健康成年大鼠41只,体重250-350g,雌雄不限。随机分为四组:（1） BMSCs组:14只,脊髓左侧半切7天后在损伤临近区注射BMSCs;（2） PBS组:14只,脊髓左侧半切7天后在损伤临近区注射PBS;（3） 单纯脊髓半切组:10只,单纯行脊髓左侧半切;（4） 假手术组:3只,仅咬除T8、9棘突和椎板;Wistar幼鼠4只,体重约100g左右,雌雄不限,用来进行BMSCs原代培养。 试剂及仪器:试剂包括:DMEM（低糖,Gibico）,维甲酸（RA）、脑源性神经营养因子（BDNF）（美国,Sigma）、兔抗鼠GFAP单克隆抗体、兔抗鼠NSE单克隆抗体等免疫试剂（武汉博士德公司）。主要仪器:①CO2培养箱②超净工作台③倒置显微镜和光学显微镜及显微照相设备（OLYMPUS日本）④动物立体定向仪⑤六孔培养板、25ml培养瓶,细胞计数板等。 实验方法: 1、将Wistar幼鼠脱颈法处死,于无菌条件下冲出股骨内骨髓,以1×109/L细胞密度种植于25ml的培养瓶,37℃,5%体积分度CO2恒温培养箱中培养。待细胞融合达90%以上时进行传代培养。 2、应用维甲酸（RA）、脑源性神经营养因子（BDNF）作为诱导剂对幼鼠BMSCs进行体外诱导,全程观察其形态变化,并对诱导后14天细胞用免疫组化染色的方法鉴定神经元烯醇化酶（NSE）,胶质纤维酸性蛋白（GFAP）
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