不同时期注射富血小板血浆对兔牵拉成骨矿化过程的实验研究

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目的应用单臂外固定支架制作兔胫骨骨干截骨延长动物模型,在牵拉成骨的不同阶段将富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)局部注射于牵拉间隙中,观察PRP对牵拉成骨矿化过程的影响,探讨肢体延长不同阶段注射PRP对兔牵拉成骨矿化过程的作用,为临床上有效的缩短新生骨的矿化过程、促进骨愈合提供理论基础。方法20只成年日本大耳白兔,重量2.5-2.8Kg,分为4组,每组5只。以0.4ml/kg肌肉注射速眠新-氯胺酮合剂,麻醉后常规备皮消毒铺巾,取兔后肢行胫骨上1/3线锯截骨,自制单臂外固定支架固定,制作肢体延长动物模型。A组:术后5天,即延长开始时,局部注射PRP500ul1次;B组:术后15天,即矿化开始时,局部注射PRP500ul1次;C组:术后25日,即矿化中期,局部注射PRP500ul1次;D组(对照组):只进行肢体延长,不使用PRP。每组在术后5天开始延长,速率为1mm/d,分早晚两次完成,0.5mm/次,共延长10天,术侧肢体完成1cm胫骨延长。各组动物分别于术后0、15、25、35天摄胫骨正位X线片,观察新骨生长情况,对比各组新骨生长及矿化情况。术后35天处死全部实验动物,切取胫骨新生骨痂制作切片,观察HE染色,取材牵拉成骨新生骨痂,在透射电镜下观察其超微结构的变化。结果1、X片:术后35天观察,B、C组新生骨痂情况明显优于A、D组。2、HE染色骨小梁面积比例测定:术后35天HE染色切片,在100倍视野中,随机选取10个,B、C组骨小梁平均占全部视野的面积比例明显高于A、D组(P<0.05),C组高于B组(P<0.05),A、D组间差异无明显统计学意义(P>0.05)。3、透射电镜观察:B、C组细胞超微结构较A、D组存在明显差异,细胞成熟程度较高。结论本实验肢体延长兔模型使用单臂外固定支架固定,能很好的模拟临床中肢体延长的过程。在牵拉成骨过程中,局部注射PRP能有效促进新生骨的矿化再生,加速骨愈合,其中尤以在矿化中期使用PRP,效果最佳。
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