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目的:应用随机引物实时荧光定量PCR检测非小细胞肺癌患者血浆游离DNA水平,以探讨其在非小细胞肺癌诊断以及评价手术治疗效果中的临床应用价值。
方法:收集105例非小细胞肺癌患者以及92例健康对照组的血浆样本,以血浆微量基因组DNA快速抽提试剂盒提血浆DNA,应用随机引物实时荧光定量PCR检测血浆游离DNA含量,并作受试者工作特征曲线。
结果:非小细胞肺癌组和健康对照组血浆游离DNA水平分别为42.5±31.5ng/ml、11.3±7.7ng/ml,NSCLC组血浆游离DNA明显高于健康对照组,差异有显著性(p<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲa期NSCLC患者血浆游离DNA分别为32.4±25.7,34.1±26.4,46.5±33.6ng/ml,各期NSCLC患者游离DNA与对照组比较,差异均有统计学意义(p<0.05);Ⅲa期DNA水平较Ⅰ期,Ⅱ期明显升高,差异有统计学意义(p<0.05),而Ⅰ期、Ⅱ期间差异无统计学意义(p>0.05)。所作受试者工作特征曲线下面积为0.847(95%可信区间为0.82-0.93),血浆游离DNA诊断NSCLC特异性为95%时,临界值确定为23ng/ml。血浆游离DNA浓度与肺癌患者临床分期以及肿瘤大小相关(p<0.05)。血浆游离DNA诊断各期NSCLC的敏感性均要高于CYFRA21-1的诊断。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲa期NSCLC患者术后血浆游离DNA水平以及血清CYFAR21-1均明显低于术前水平,差异具有统计学意义。
结论:血浆游离DNA定量检测可以作为非小细胞肺癌早期诊断与观察手术疗效的标记物。