目的:1、以新疆和田红葡萄树伤流液为研究对象,以体外抗氧化试验为活性评价手段,采用HPD400、SephadexLH-20、反相C₁₈硅胶柱三种填料依次对新疆和田红葡萄树伤流液中的化学成分进行分离纯化;2、利用HPLC、半制备液相色谱、NMR、UPLC-MS、IR,对新疆和田红葡萄树伤流液中化学成分进行分析、分离及结构鉴定。方法:1、以V_C作为阳性对照,采用ABTS·法、·OH试剂盒法、DPPH·法和NO₂^-·法测定新疆和田红葡萄树伤流液的抗氧化能力。以没食子酸为标准品,采用Folin-Ciocalteu比色法测定不同贮藏年份下的新疆和田红葡萄树伤流液中总多酚含量及抗氧化活性的变化;2、分离纯化工作选用Sephadex LH-20对经大孔吸附树脂60%乙醇洗脱得到的部分进行进一步考察,主要考察其三个因素:上样量、洗脱剂用量、洗脱溶剂浓度;并进行正交实验;采用反相C₁₈柱对Sephadex LH-20分离Ⅱ部分进一步纯化;采用HPLC对和田红葡萄树伤流液中6种单体酚的含量进行测定;采用DAD检测器对半制备液相色谱最佳检测波长进行确定;由分析型液相模式直接放大到半制备液相模式,梯度洗脱分离组分含量相对较高的化合物;3、将分离得到的单体化合物进行核磁共振(¹H-NMR、¹³C-NMR、H-HCOSY、HSQC、HMBC)和TOF-MS等波谱进行结构鉴定。结果:1、新疆和田红葡萄树伤流液对不同自由基均具有不同程度的清除能力,对·OH清除能力最强,且均强于阳性对照Vc（0.2mg/mL）的清除能力,对不同自由基的清除率依次为·OH>DPPH·>ABTS·>NO₂^-·;通过对新疆和田红葡萄树伤流液不同贮藏时间下总酚含量及抗氧化活性进行测定,可以发现总酚含量及抗氧化活性随着贮藏时间延长均呈下降趋势;2、通过单因素考察和正交试验,以DPPH·清除率为评价指标,确定了Sephadex LH-20层析柱最佳纯化工艺:上样量为2%柱体积,洗脱浓度为70%甲醇,洗脱液用量为5个柱体积,流速为1滴/秒;采用反相C₁₈柱对经Sephadex LH-20分离Ⅱ部分进一步纯化,可得到20%⁷0%甲醇洗脱部分;HPLC分析可得Sephadex LH-20柱分离经60%乙醇洗脱部分,可得到明显的两个部分（Ⅰ部分和Ⅱ部分）,梯度洗脱条件为0³0 min,90⁸5B%;30⁶0min,85⁹0 B%（A-B:甲醇-水）,结果显示Ⅱ部分在保留时间10min³0min分离效果好,Ⅰ部分出峰保留时间集中在10min之内,且在该条件下分离效果不好,因此后续主要集中于对Ⅱ部分的分离;采用DAD检测器确定半制备液相色谱最佳检测波长为260nm和280nm,在这两个波长下组分峰信号强且纯度高;HPLC分析和田红葡萄树伤流液中含有没食子酸、儿茶素、表儿茶素三种单体酚,含量较低;3、通过半制备液相色谱分离得到6个化合物,面积归一化得纯度都在90%以上;通过核磁,质谱等波谱数据,对含量较高的三个化合物进行结构解析,得到0号化合物为2-羟基3-苯基乳酸。结论:新疆和田红葡萄树伤流液具有较强的抗氧化能力,尤其是对·OH清除能力最强;首次选用HPD400、Sephadex LH-20层析柱和反相C₁₈柱依次对新疆和田葡萄树伤流液进行分离纯化,通过半制备分离得到了6个纯度较高的化合物;在HPD400大孔树脂的分离基础上,Sephadex LH-20葡聚糖凝胶的分离效果显著,选择反相C₁₈柱主要起到了两个作用,一方面对Ⅱ部分起到进一步分离纯化作用,另一方面也对样品当中易死吸附物质进行去除,为半制备液相色谱柱起到更好的保护作用。结合IR、NMR和MS对其中0号,1号,5号三个含量相对较高的化合物进行结构解析。