目的:在现代饮食结构下,脂肪肝越来越成为不可忽视的疾病之一,死亡率逐年增高,探索低脂饮食是否可以解决脂肪肝以及低脂饮食控制脂肪肝的具体机制成为本课题关心的重点。肝脏脂质从头合成途径的关键分子三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶（ATP citrate lyase,Acly）是一种胞质同源四聚体酶,可以在三磷酸腺苷（ATP）的作用下,催化柠檬酸和辅酶A转化为乙酰辅酶a和草酰乙酸酯。目前,在代谢紊乱等病理状态下,Acly的表达对于非酒精性脂肪肝病的动态调控作用尚未完全阐明。机体中各种形式的生命活动离不开体内蛋白质水平的动态平衡。一旦失衡,机体将出现各种病理过程。既往研究报道,Acly可以通过泛素-蛋白酶体途径被泛素化降解,但具体机制尚不明晰。羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1（HMG-Co A reductase degradation protein 1,Hrd1）是内质网相关蛋白降解（endoplasmic reticulum-associated degradation,ERAD）复合物的亚基之一,在蛋白质泛素化途径中起到了承前启后的作用。它主要是负责将泛素分子连接到目的蛋白质上,形成多泛素链,使得目的蛋白质被蛋白酶体识别进而被降解。非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）的典型病理改变是脂肪变性和肝细胞损伤。因此,本课题旨在找到可以通过调控Acly缓解非酒精性脂肪肝病变的分子,为非酒精性脂肪肝病的临床防治提供策略。方法及结果:在人肝癌细胞系Hep G2、小鼠原代肝细胞中进行免疫共沉淀联合质谱检测Hrd1互作蛋白。免疫共沉淀实验证实Hrd1可与Acly发生蛋白质-蛋白质相互结合并泛素化降解Acly,降低Acly的蛋白质水平。Western blot实验表明在非酒精性脂肪肝病中,Hrd1表达水平降低。分别测定乙酰辅酶a水平和脂肪生成率,证实Hrd1可依赖于Acly降低乙酰辅酶a水平,抑制脂肪酸合成。由于非酒精性脂肪肝病的主要病理表现是脂质沉积,因此,随后在db/db小鼠中通过尾静脉注射过表达Hrd1腺病毒后在肝脏中特异性过表达Hrd1,检测甘油三酯含量、肝重及积累的脂滴数量等指标,证实过表达Hrd1可以改善肝脏脂肪变性。由于肝脏是全身能量代谢的中枢器官,因此使用同一批小鼠,检测基础血糖、血清胰岛素水平、葡萄糖稳态、胰岛素稳态以及胰岛素敏感性,证实Hrd1在肝脏中特异性过表达可以维持全身能量代谢稳态。在已有体内实验的基础上,进一步分离原代肝细胞,在体外模拟脂肪变性,证实Hrd1表达上调可以抑制脂质合成,减少脂质沉积,缓解胰岛素抵抗,提高胰岛素敏感性。结论:调节脂肪生成的关键酶Acly可以被Hrd1泛素化降解,导致乙酰辅酶a水平降低,抑制肝细胞的脂质合成,从而大大缓解脂肪变性。肝脏Hrd1表达上调也可以缓解全身能量代谢紊乱。本课题的研究结果表明Hrd1可能是非酒精性脂肪肝病的一个潜在治疗靶点。