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本实验应用快速、敏感、特异性强及重复性好的间接ELISA法成功的对雏鸡感染IBV后第1天至第28天以及其对照组的血清、泪液、气管灌洗液和十二指肠灌洗液中特异性抗体和总IgG含量进行检测;同时,根据巨噬细胞黏附能力强、贴壁快的特点,应用差速黏附法纯化巨噬细胞,通过调整黏附培养时间长短和温度来控制巨噬细胞纯度,成功获得雏鸡骨髓巨噬细胞和脾脏巨噬细胞,并应用中性红吞噬法、MTT法、酸性磷酸酶法、一氧化氮法以及IL-1诱导法等多种方法进行巨噬细胞活性的检测。结果表明: 1.SPF雏鸡在感染IBV后,第3天就可检测到特异性抗体,在第14天达到高峰,并维持数周;其中局部免疫(气管、副泪腺和肠黏膜)先于全身产生特异性免疫应答,而非特异性抗体水平低于健康对照组。说明患病鸡总体体液免疫降低,特异性体液免疫增强;而局部体液免疫产生快而短暂,全身体液免疫产生较缓但持续时间较长。 2.SPF雏鸡在感染IBV后,巨噬细胞活性(吞噬性、自身活力、ACP、NO)明显高于健康对照组,其中脾脏巨噬细胞发生在第7~10天之间;骨髓巨噬细胞的活性则在第3~10天和第7~21天之间。表明IBV感染促使巨噬细胞活化,吞噬能力增强,胞内酸性磷酸酶含量明显增加,分泌活性及抗原呈递能力增强,参与IBV感染的主要过程,与体液免疫变化基本一致,但持续时间较特异性IgG长。 3.在IBV感染过程中,巨噬细胞IL-1产生增加,反映细胞免疫功能增强;机体IBV感染后,巨噬细胞的作用显著,通过细胞因子网络、抗原呈递作用与其它免疫细胞发生联系,增强SPF雏鸡的特异性免疫应答。 提示雏鸡感染IBV后机体体液免疫力有所降低,巨噬细胞参加IBV的免疫应答,在抵抗传染性支气管炎病病毒中发挥了重要作用。探索了雏鸡感染IBV后机体特异性抗体产生变化规律与巨噬细胞介导的非特异性免疫应答产生和变化的相关性。