妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘有机阴离子转运多肽OATP1A2、1B1、1B3表达研究

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[背景]妊娠期肝内胆汁淤积症(Intrahepatic cholestasis of pregnancy, ICP)是发生在妊娠中、晚期的特殊并发症之一,以瘙痒,黄疸为主要临床表现,以肝功能异常,尤其是胆汁酸升高为主要生化改变。其对孕妇影响不大,主要危及胎儿,表现为早产、胎儿宫内窘迫、突发胎儿宫内死亡等,使围产儿发病率和死亡率明显增加。ICP病因复杂,具体机制尚无定论,认为与激素、环境、基因等因素相关。此外,ICP所致的胎儿高风险成为目前学者们关注的焦点,也是临床上亟需攻克的难题。ICP最显著的特点是孕妇血胆汁酸水平明显升高,可为正常孕妇的几倍至20倍。母血胆汁酸水平目前已作为ICP临床诊断和分级标准。高胆汁酸水平与胎儿风险密切相关也已公认,其相应的胆汁酸转运代谢也成为了研究的热点。既往研究表明胆汁淤积相关疾病的发生与胆汁酸转运体表达相关。近年来,随着ICP研究机制的深入以及肝脏胆汁酸相关转运体研究的成熟,胎盘中是否存在胆汁酸相关转运体以及其可能的变化也引起了学者们的关注。本研究中,我们即以胎盘中发现的具有胆汁酸转运功能的有机阴离子多肽OATPs (OATP1A2.OATP1B1、OATP1B3)为靶点,研究其在ICP胎盘中的表达,分析其与ICP胎儿高风险的可能相关性。[目的]:研究胆汁酸相关有机阴离子转运多肽OATP1A2、OATP1B1、OATP1B3在ICP胎盘与正常胎盘中的表达情况,分析其表达差异与胎儿风险可能的相关性。[方法]:收集30例ICP胎盘组织和30例正常胎盘组织及相关病例的脐血、母血(各5ml)。用放射免疫法测定脐血与母血中胆酸水平;用Real-time PCR检测两组胎盘OATP1A2、OATP1B1、OATP1B3的mRNA水平;Western blot验证两组胎盘OATP1A2、OATP1B1、OATP1B3蛋白水平;通过免疫组化方法检测OATP1A2、OATP1B1、OATP1B3在胎盘中的定位。[结果]:1)胆酸水平:ICP组母血胆汁酸水平较正常组明显升高(P<0.001),ICP组脐血胆汁酸水平较正常组增高(P<0.05),胆汁酸母血/脐血相对比值ICP组较正常组高(P<0.001);2)胎盘胆汁酸相关转运体mRNA和蛋白表达:ICP组OATP1A2、OATP1B3其mRNA表达水平均较正常组下调(P<0.05),OATP1B1在ICP组和正常组中表达均存在明显的个体差异,但两组间的表达无差异(ICP vs control,7/20 vs 8/20);ICP组OATP1A2、OATP1B3其蛋白表达水平均较正常组下调(P<0.05),未检测到OATP1B1蛋白;3)免疫组化:胎盘OATP1A2在血管合体膜、局部合体滋养细胞层顶膜强表达;胎盘OATP1B3主要定位于血管合体膜,其中合体滋养细胞层绒毛膜及胞核存在散在表达。[结论]:1)胎盘胆汁酸相关有机阴离子转运体OATP1A2.OATP1B1和OATP1B3,尤其是OATP1A2和OATP1B3的表达下调导致母胎间胆汁酸代谢异常可能是增加妊娠期肝内胆汁淤积症胎儿风险性的一个重要因素,上述转运体表达的改变可能参与了ICP的发生。2)OATP1A2和OATP1B3在胎盘血管合体膜的高表达提示OATP1A2和OATP1B3在妊娠晚期母胎间胆汁酸转运中可能起重要作用。
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