马铃薯是全世界最重要的高产作物,我国马铃薯的种植面积居世界第二位。目前在马铃薯作物上已发现的病毒、类病毒多达20余种,是影响马铃薯产量和质量的主要病害,引起的常年马铃薯产量损失达15~20%。因此马铃薯病毒检测及其如何利用基因工程手段进行防治引起了各国的极大重视。开发快速、灵敏、规范化的检测体系是病毒检测发展的必然方向。马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)和马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)是其中两种严重危害我国马铃薯生产的病毒。本实验以感染马铃薯A病毒和马铃薯S病毒的叶片为实验材料,比较了提取植物总RNA的两种方法。根据马铃薯A病毒和马铃薯S病毒的外壳蛋白基因序列,分别设计合成了两对寡核苷酸引物,以提取的病毒RNA为模板进行cDNA合成并运用PCR技术进行体外扩增,得到两条长度分别约678 bp和642 bp的特异PCR扩增产物,与设计的外壳蛋白基因大小一致,而对照未得到任何产物。从而建立了快速、灵敏、有效的PVA和PVS的RT-PCR检测技术,为PVA和PVS的检测提供了有效手段。用DAS-ELISA检测方法对PVA和PVS进行了检测,并将检测结果与RT-PCR检测结果进行了对比分析,发现RT-PCR检测的灵敏度和特异性均高于DAS-ELISA检测,但ELISA检测更适合于大量样品的检测。