背景小细胞癌（Small cell lung cancer,SCLC）是一种生长迅速、早期广泛转移的侵袭性的神经内分泌肿瘤,占所有肺恶性肿瘤的比例约为15%。SCLC起源于支气管内的神经内分泌细胞前体,最常发生在肺内,但偶尔也会发生在身体的其他部位,如宫颈、前列腺和胃肠道。SCLC传统的治疗方式为化疗和放疗,但是放化疗副作用大,患者难以耐受,且治疗后肿瘤易复发,导致患者的预后较差,早期和晚期小细胞肺癌患者的5年总生存率分别为14.7-27.3%和2.8%。Tfh细胞是新发现的一类CD4+T细胞,其主要作用于次级淋巴器官中GC反应期间B细胞的辅助。Tfh细胞在引导分泌高亲和力抗体B细胞和记忆B细胞的形成时发挥关键作用。Tfh细胞通常表达CXCR5、IL-21、PD-1、Bcl-6等表面分子,CXCL-13是Tfh细胞的重要趋化因子,对Tfh细胞的迁移、定位、分化、发育起重要的辅助作用。近期研究报道,Tfh细胞可能对滤泡性淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤等多种癌症的发病机制有重要的影响,但是它在小细胞肺癌中的作用还不明确。探究Tfh相关细胞因子CXCL-13在SCLC中发挥的作用可以有助于我们进一步揭示SCLC的发生机制,为SCLC的早期诊断和治疗提供新的靶点和策略。实验方法:1.研究设计:1.1.纳入2015年9月到2016年9月期间,在新桥医院呼吸内科住院治疗的小细胞肺癌患者,并且经胸部CT或者行胸片CR的检查、及行病理学诊断明确的小细胞肺癌患者为研究对象。同期从健康体检中心随机抽取健康体检患者,将其纳入为健康对照组。收集小细胞肺癌组和健康对照组患者的血清,并使用ELISA试剂盒,通过酶标仪检测小细胞肺癌患者和健康对照组血清中CXCL-13的表达水平。1.2.根据TNM分期将小细胞肺癌组患者进行临床分期,检测和统计各期小细胞肺癌患者血清中CXCL-13的表达水平,研究Tfh活化特异因子CXCL-13与小细胞肺癌分期的相关性。2.小细胞肺癌患者和健康对照者在清晨空腹时抽血,使用含促凝剂的采血管采集各组人群的静脉血约5ml。抽血完成后,将采血管放置在室温条件下,并静置30min。全血自凝后,将采血管放置高速离心机离心,3000转/分,10min。离心完成后,吸上清至新的EP管中,做好标记,将装有样本的EP放入-80℃冰箱中保存。3.使用人CXCL-13 ELISA试剂盒,根据ELISA试剂盒的操作说明书进行实验,最后通过酶标仪检测小细胞肺癌患者和健康对照者血清中CXCL-13的表达水平。注意:检测前需要提前将样本从-80℃冰箱中取出解冻。4.详细记录小细胞肺癌患者和健康对照者的基本信息和临床资料:包括姓名、性别、年龄、吸烟史、TNM分期等。5.统计方法:采用x±s来对计量资料进行描述、统计,分析数据的软件为SPSS 20.0,计量资料的分析方法为t检验和方差分析;采取例数和百分比对计数资料进行描述、统计,计数资料的分析方法为卡方检验。t检验、方差分析和卡方检验的检验水准α均为0.05。研究结果1.第一部分结果:采集人群（肺癌组）为呼吸科住院部病人28人,健康体检中心纳入对照组（非肺癌患者）共随机选取了38人。其中实验组28人,男性23人,女性5人,年龄小于55周岁10人,年龄大于或等于55周岁18人,吸烟数小于200年支13人,大于200年支15人;对照组共随机选取了38人,男性20人,女性18人,年龄小于55周岁29人,年龄大于或等于55周岁9人,吸烟指数小于200年支30人,大于200年支8人,通过卡方检验,在吸烟史的比较中,小细胞肺癌组相较于健康组,吸烟指数>=200年支的比例显著升高,差异有统计学的意义（P<0.05）。2.第二部分结果:使用人CXCL-13 ELISA试剂盒,并通过使用酶标仪检测小细胞肺癌患者和健康对照者血清CXCL13的表达水平发现,CXCL-13在小细胞肺癌患者的血清中的表达较健康对照组显著增高。并且,通过将总体人群分别按照性、年龄、吸烟史分组,进一步分许各相关因素对血清CXCL-13表达的影响。通过分析比较发现,分别按照性别、年龄以及吸烟情况来统计时,血清CXCL-13的表达水平在各组中没有显著差异。说明CXCL-13与小细胞肺癌之间的相关性与性别、年龄和吸烟史无关,血清中CXCL-13表达的升高可能为小细胞肺癌发生的独立危险因素。3.第三部分结果:按照患者的TNM临床分期,使用人CXCL-13 ELISA试剂盒,检测各期小细胞肺癌患者血清中CXCL-13的表达,分析CXCL-13的表达与小细胞肺癌的分期是否相关。研究发现CXCL-13的表达水平与单一临床肿瘤分期之间不存在显著的统计学差异。将一期和二期合并,三期和四期合并之后,再次分析发现,CXCL-13的血清学表达水平临床分期有着显著的统计学差异,三期和四期血清中CXCL-13的表达水平显著高于一期和二期。结论1.血清中CXCL13的表达水平与小细胞肺癌的发生相关,CXCL13可能在小细胞肺癌的发生中起促进作用。2.血清中CXCL-13的表达水平与小细胞肺癌的进展相关,血清中CXCL-13的表达水平越高,提示小细胞肺癌的分期越晚。