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目的：研究孕期感染柯萨奇B3病毒对子代心脏发育及发育过程中特异性转录因子NKx2.5、GATA-4、TBX5基因与蛋白表达的影响，并在此基础上讨论叶酸干预对CVB3感染的子代心脏是否有保护作用。方法：将清洁级健康的SD雌鼠按随机数字法分为4组：对照组、叶酸组、柯萨奇B3病毒组及叶酸+柯萨奇B3病毒组。孕前2周叶酸组、叶酸+柯萨奇B3病毒组予以叶酸灌胃，当雌鼠怀孕第7d时柯萨奇B3病毒组、叶酸+柯萨奇B3病毒组给予腹腔注射CVB3，连续5d。自然分娩后取新生鼠心脏组织，病理切片HE染色观察新生鼠心脏组织形态学变化；用蛋白免疫印迹法（Westernblot）及逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测新生鼠心脏组织中NKx2.5、GATA-4、TBX5因子蛋白及基因表达。结果：1.病理切片HE染色显示与正常对照组相比，柯萨奇B3病毒组的新生鼠心肌损伤明显，心肌细胞排列紊乱，心肌纤维断裂,叶酸干预后感染柯萨奇B3病毒的新生鼠心肌损伤状态改善。2.柯萨奇B3病毒组的新生鼠心脏组织中NKX2.5、GATA-4、TBX5蛋白表达及基因表达明显低于对照组，柯萨奇B3病毒组+叶酸组的NKX2.5、GATA-4、TBX5蛋白表达及基因表达高于柯萨奇B3病毒组。结论：CVB3感染造成NKx2.5、GATA-4、TBX5基因及蛋白表达水平下降在先天性心脏病发病机制中起着重要作用。叶酸可逆转CVB3感染造成的NKx2.5、GATA-4、TBX5基因及蛋白水平的低表达，对先天性心脏病具有预防性保护作用，其机制可能是通过上游主基因NKx2.5、GATA-4、TBX5调控促进下游基因表达及减少细胞凋亡促进心脏发育功能恢复来起作用。