目的:采用TIGAR转基因小鼠,观察TIGAR基因对小鼠脂质代谢的影响,同时在3T3-L1脂肪细胞中进行验证,进一步对其机制进行探究。方法:体内构建TIGAR转基因小鼠模型,5周龄TIGAR转基因小鼠以及同窝出生的野生型小鼠在同等条件下喂养16周,同一时间内测量每组小鼠体重、摄食量和饮水量;采用血糖测定方法测量8周龄小鼠葡萄糖耐量及胰岛素抵抗;采用间接量热法测定8周龄小鼠的能量指标(氧气消耗量,二氧化碳的产出量,呼吸率和能量消耗);用TC,TG,LDL-C和HDL-C试剂盒检测TIGAR对血脂的影响;称量小鼠不同部位的脂肪量(附睾,皮下,腹膜后,棕色脂肪)以及肝脏重量,通过HE和油红O染色观察脂肪的大小,数量以及损伤情况;采用RT-PCR,Western blot技术观察过表达TIGAR对脂肪合成和脂肪分解相关蛋白mRNA及蛋白的表达。在体外按照通常的方法对3T3-L1前脂肪细胞培养和诱导分化,采用脂质体法将小RNA干扰链转入到细胞,通过油红O染色观察敲低TIGAR对脂滴数量和大小的影响;采用RT-PCR,Western blot技术检测敲低TIGAR对脂肪合成和脂肪分解相关蛋白mRNA及蛋白的表达。结果:体内实验中,与野生型小鼠相比,TIGAR转基因小鼠能使小鼠体重明显增加(P<0.05),糖耐量和对胰岛素敏感性降低(P<0.01),具有统计学意义;TIGAR转基因小鼠耗氧量以及二氧化碳产出量较高(P<0.05),具有统计学意义,但能量消耗和呼吸率没有显著差异(P>0.05);TIGAR转基因小鼠脂肪组织以及肝脏重量增加,脂滴增加,肝脏严重损伤,具有明显差异(P<0.01);TIGAR转基因小鼠能够使血糖血脂升高,具有统计学意义(P<0.01);TIGAR转基因小鼠脂肪的合成相关因子mRNA水平和蛋白表达量增加(FAS,ACC,PPAR-γ),脂肪的分解相关因子mRNA水平和蛋白表达量降低(HSL,ACOX),具有统计学意义(P<0.05)。体外试验中,敲低TIGAR基因能够使脂滴减小,脂肪的合成相关因子mRNA水平和蛋白表达量下降,但脂肪的分解相关因子mRNA水平和蛋白表达量增加,具有统计学意义(P<0.05)。结论:与野生型小鼠相比,TIGAR转基因小鼠体重增高,摄食量和摄水量增加,脂肪组织和肝脏的含量增加并有不同程度损伤;TIGAR转基因小鼠血脂、血糖升高;TIGAR转基因小鼠的糖耐量以及胰岛素敏感性下降,但是耗氧量和二氧化碳产出量均有增加;过表达TIGAR有利于脂肪的合成抑制脂肪的分解。本课题着重探讨了TIGAR对脂肪合成酶和分解酶的直接调节作用,发现TIGAR的新功能,为肥胖的基因治疗提供了新思路。