N-聚糖分析方法开发及其在癌症标志物研究中的应用

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:HC_luopo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,在诸多癌症中均观察到血清N-聚糖的异常变化,表明血清N-聚糖能够作为癌症诊断的新型生物标志物。然而,鉴于天然N-聚糖的性质,在N-聚糖标志物研究中仍面临诸多挑战。因此,本文建立了多种衍生策略用于N-聚糖的定性定量分析,并对特异性癌症标志物进行筛选。主要研究内容如下:将甲胺化和还原化双衍生策略同nano LC-ESI-MS相结合用于血清N-聚糖异构体的分离分析。通过对胰腺癌和健康样本血清N-聚糖异构体进行统计,筛选出25个具有显著差异的异构体,其中4个异构体的AUC值超过0.90,表现出较高的诊断准确度。另外,这些异构体还被用于胰腺癌早期诊断研究。与数据归一化不同,本文将d0/d5-苯甲酰氯和甲胺化共衍生策略用于N-聚糖定量分析,更直观地展现N-聚糖的变化。利用微波辅助快速酶切实现糖胺的快速释放,有效缩短了分析流程。此外,天然酸性N-聚糖在MALDI-MS中会发生源内或源后裂解,而甲胺化不仅能稳固唾液酸,还能提高N-聚糖的信号响应,进而实现中性糖和酸性糖的同时定量分析。以不同的摩尔比对核糖核酸酶B(RNase B)N-聚糖进行分析,其线性相关系数均超过了0.9992,展现了良好的线性定量能力。将该方法用于骨髓瘤患者血清N-聚糖分析,筛选出5个可用于早期诊断的特异性N-聚糖标志物。在上述基础上,将nano LC-ESI-MS用于双衍生修饰的N-聚糖异构体的定量分析。通过对标准品N-聚糖进行分析,实现中性糖和酸性糖异构体的有效分离。而结合特异性α2-3糖苷外切酶,实现N-聚糖异构体唾液酸连接类型的有效识别。该方法还被用于同一骨髓瘤患者不同给药阶段血清N-聚糖异构体的分析,为药效预判提供了特异性N-聚糖标志物。以上试剂是不具备荧光基团的,本文建立了一种基于9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯(Fmoc N-hydroxysuccinimide ester,Fmoc-OSu)的N-聚糖分析方法,较为便捷地为N-聚糖提供了荧光标签。通过微波辅助快速酶切,有效防止了糖胺的水解。此外,Fmoc基团的引入显著提高了N-聚糖的信号响应,有助于低丰度N-聚糖的检测。值得说明的是,通过对Fmoc基团进行有效释放,成功制备出较高纯度的N-聚糖标准品。另外,该方法还被用于早期肺癌特异性N-聚糖标志物的筛选。综上,本文从糖组成和异构体角度对N-聚糖进行了定性定量研究。甲胺化有效稳固了唾液酸基团,进而使中性糖和酸性糖的同时定量分析成为可能。此外,不仅对酸性N-聚糖异构体上唾液酸的连接类型进行了有效解析,还成功制备出N-聚糖标准品。另外,对癌症血清样本的分析为特异性N-聚糖标志物的探寻提供了应用前景。
其他文献
中国画是独属于中国文明的艺术创作,承载着中国悠久的历史与中国文人的思想精神。教师在引导学生学习中国画时,要注重学生审美能力的培养,引导学生感知中国画中的思想内涵。
美国白蛾Hyphantria cunea(Drury)是中国重要的外来入侵害虫。为了探明寄主与非寄主挥发物成分对美国白蛾寄主选择行为的影响,本研究选择了美国白蛾9种寄主植物包括桑树,洋白蜡
<正>微观主体有活力,高质量发展才有源头活水。如何看待当前经济形势?面对产业变革与中国经济转型的历史性交汇,企业该怎样应对新挑战,实现高质量发展?此间在济南举行的"第三
由于植物固着生长,其无法通过移动来逃避逆境,故非生物胁迫(如极端温度、盐胁迫、干旱或光胁迫等)会伴随着植物的整个生长发育过程,严重胁迫植物的分布、生长、品质和产量,甚
<正>准确收集尿液,监测尿量的多小、密度、颜色,是临床护理工作中的重要内容,它直接反映肾血液灌流量,间接揭示全身血容量充足与否,并能及早发现早期休克,以及肾功能衰竭的临
会议
目的应用输液泵在持续膀胱冲洗且计量每小时尿量患者中的应用效果。方法在持续膀胱冲洗患者中使用输液泵将冲洗液泵入,然后以抗返流精密尿袋收集每小时的引流液减去输液泵上
党的十九届四中全会对国家制度显著优势从十三个方面进行了集中概括,高校如何向学生讲清楚国家制度优势,以引导学生增强"四个自信",是需要思考和实践的问题。揭示国家制度优
氢是一种理想的清洁可再生能源,是解决目前的全球化石能源危机以及温室效应等环境问题的一种替代性能源。类石墨氮化碳(g-C_3N_4)这种环保有机半导体已被用于光催化产氢,但g-C_3N_4的光电子在迁移过程中容易与光空穴复合,这严重影响了其光催化活性。石墨烯(Graphene)因其超大比表面积、优异的导电性以及常温下快速的载流子迁移速率而被广泛应用于改善光催化产氢材料的性能。通过向g-C_3N_4中
无产阶级思想政治教育的立场、任务与实践原则是把握思想政治教育范畴、本质、规律和方法的重要依据。通过对马克思恩格斯诸多经典论断的解析可以发现,理解和践行无产阶级思
利用燃烧合成法结合放电等离子烧结(SPS)技术在1 h内实现了ZrNiSn热电材料的制备,对样品的晶体结构、物相组成、微观结构以及热电性能进行了研究。晶体结构和物相分析结果表明,