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本研究以洋桔梗（Eustoma grandiflorum）“Double Mariachi Pink”品种为试材，建立了该品种的离体培养高频再生体系；构建了菜豆几丁质酶基因的植物表达载体，并对“Double Mariachi Pink”进行了转化。卡那霉素（Km）抗性筛选和PCR检测结果表明，菜豆几丁质酶基因已转入该品种，为进一步培育抗真菌性病害的洋桔梗新品种奠定了重要基础。在本研究中，首先以洋桔梗的叶片为外植体，研究了不同的切割方式、培养基中6-BA（0、0.1、0.5和1.0mg／L）与NAA（0、0.01、0.05和0.1mg／L）的不同配比对不定芽分化的影响；并测定了不定芽分化对Km的敏感性。研究结果表明，“五刀切”与“三刀切”对不定芽分化数量的影响无显著性差异，“三刀切，中间不切断”与“三刀切”和“五刀切”相比，不定芽分化数少；MS+6-BA1.0mg／L为叶片不定芽分化的最适培养基；在此培养基上，不定芽分化率达100％，1.0cm×1.0cm大小的叶块上不定芽分化数平均达25.4；将获得的不定芽在MS+6-BA0.1mg／L+NAA0.05mg／L培养基中增殖，芽苗在1／2MS+NAA0.1mg／L培养基中生根，从而建立了“Double Mariachi Pink”的高频再生体系。另外，25mg／L的Km为抑制洋桔梗叶片不定芽分化的最低浓度。然后，根据菜豆Ⅰ类几丁质酶基因序列（M13968——GenBank登录号），设计了一对特异引物（P1：5’-tac tct aga atg aag aag aat agg atg atg 3’；P2：5’cgc gaa tcc tca ctg aga ggt gac aag aag-3’），进行PCR扩增；回收扩增产物，进行T-A克隆、测序鉴定表明已分离、克隆了菜豆几丁质酶基因；将该基因与pBI121相连，成功构建了菜豆几丁质酶基因植物表达载体（pBI121-Chi）；通过电转化法，将pBI121-Chi导入根癌农杆菌LBA4404中。最后，将洋桔梗叶片与含pBI121-Chi的LBA4404共培养，经过除菌、Km抗性筛选和再生诱导，获得了20个抗性株系；根据菜豆几丁质酶基因序列和pBI121序列（AF485783）设计PCR引物（P3：5’-aca gaa ctc gcc gta aag-3’；P4：5’-atg aag gca tcg tag gtg tag aag c-3’），从11个抗性株系中扩增到了与目的片段长度（832bp）吻合的的特异性条带，表明菜豆几丁质酶基因已整合到洋桔梗基因组中。此外，本研究还观察到GA3可促进洋桔梗种苗节间伸长，有效地缩短了育苗期、防止簇生。