论文部分内容阅读
目的通过检测不同年龄组国人角膜缘基底细胞及透明角膜上皮细胞HTERT的表达,以证实HTERT作为角膜上皮干细胞标志物的可能性,并且通过定量检测不同年龄组国人角膜上皮干细胞HTERT的表达探讨干细胞增殖分化能力与年龄的相关性,了解角膜上皮干细胞生理特性,从分子生物学水平揭示眼表的生理特性及眼表疾病的成因,为临床诊疗及角膜上皮干细胞移植供体的选择提供理论依据。方法采集不同年龄组正常国人角膜缘基底细胞及透明角膜上皮细胞,除外肿瘤、翳状胬肉及干眼症等角膜上皮干细胞异常供体。无菌状态下破碎细胞,抽提RNA,以RNA为模板,加入HTERT特异引物经RT-RCR反转录成CDNA后进行产物扩增,然后取样行琼脂糖凝胶电泳,紫外可见分析仪定性分析各标本HTERT含量。对阳性标本进一步进行HTERT含量实时定量测算,然后应用SPSS11.5统计软件对所获数据进行统计分析。结果定性检测结果角膜缘基底细胞HTERT表达阳性,透明角膜上皮细胞HTERT表达阴性;定量检测10-80岁各年龄组国人角膜缘基底细胞HTERT相对含量平均值分别为2.592、3.165、3.433、3.685、3.392、3.563、3.315、3.380。SPSS11.5统计软件分析各组数据间差异无统计学意义(P=0.96)。结论角膜缘基底细胞HTERT表达阳性,透明角膜上皮细胞HTERT表达阴性,HTERT可作为角膜上皮干细胞标志物之一;不同年龄组国人角膜上皮干细胞HTERT表达水平不随年龄而变化,其增殖分化能力不随增龄而衰变。