朱砂叶螨钠通道基因克隆及其kdr突变研究

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:A578964735
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)是一种为害严重而又难以防治的重要农业害螨,该螨世代周期短.繁殖力强,近亲交配率高,受药机会多,很容易产生抗药性。昆虫(螨)抗药性是由于杀虫剂表皮穿透性降低、解毒酶活性的增强和靶标系统的不敏感性而引起。电压门控钠离子通道是DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂的作用靶标,这两类杀虫剂主要通过改变昆虫神经膜上钠离子通道功能而起杀虫作用。昆虫则通过改变其钠离子通道结构,降低对药剂的敏感性来产生对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性。本文在室内选育朱砂叶螨敏感品系和甲氰菊酯抗性品系的基础上,监测了该螨不同地理种群对甲氰菊酯的抗性水平,建立了朱砂叶螨实验种群生命表,克隆并比较了敏感和甲氰菊酯抗性品系钠通道基因cDNA序列,解析了敏感和抗性品系钠通道基因mRNA的表达模式。获得如下主要结果:1.药膜法生物测定结果表明,与敏感品系相比,朱砂叶螨室内抗性筛选品系对甲氰菊酯的抗性达98.5倍,重庆、浙江、湖北和云南地理种群的抗性水平分别为7.6、9.3、11.8和16.2倍;三种增效剂联合(增效剂:甲氰菊酯=3:1和9:1)可抑制室内抗性品系约50-85%的抗性。2.实验种群生态学研究结果表明,与敏感品系相比,室内抗性品系存在生殖不利性,同时发育速率加快,平均世代历期缩短。3.通过RT-PCR及RACE技术,克隆获得敏感和甲氰菊酯抗性品系钠通道基因(GenBank登录号分别为:GU196305和GU569881), cDNA全长5664bp,编码1888个氨基酸,包括结构域ⅠS1-IVS6;两条基因都含有可变剪切SV1和SV2:从室内抗性品系鉴定出一个点突变(F1538I),该点突变以不同频率存在室内抗性品系和不同地理种群中,但在敏感品系中的频率为0,表明该突变是朱砂叶螨的kdr突变。4.通过Q-PCR,解析了敏感和抗性品系钠通道基因mRNA的表达模式,结果显示两个抗性品系(阿维菌素抗性品系设为对照)钠通道基因的表达量都显著低于敏感品系,表明钠通道基因mRNA表达量的减少与kdr抗性无关。
其他文献
期刊
期刊
期刊
在建筑工程项目中,管理工作的主要目标就是在保证工作人员安全的前提下,提升工程项目的品质,打造合格的工程项目.但是在当前的安全质量监督管理中还存在一些问题,给工程项目
期刊
期刊
期刊
玉米穗腐病是我国玉米生产上的重要病害,不仅直接造成玉米产量的损失,而且产生的伏马毒素严重影响玉米的品质,甚至威胁人畜的健康。本文采用HPLC-柱后衍生法系统监测了2014年贵