淀粉和纤维素是自然界中最廉价、最丰富的可再生资源,糖化酶和内切葡聚糖酶是降解它们最关键的酶类。为了利用丰富的淀粉和纤维素资源,就必须获得性质优良的糖化酶和内切葡聚糖酶。真菌来源的糖化酶和内切葡聚糖酶是目前淀粉酶和纤维素酶研究的主要部分。过氧化氢酶是一种重要的工业酶制剂,它能催化分解过氧化氢生成水和氧气,在食品、医药,纺织等行业具有广泛的应用潜力。因此,开发出真菌来源的新型过氧化氢酶具有重要的研究价值。本实验室(蛋白质表达及分子生物学实验室)前期对粉红粘帚霉菌全基因组进行了测序,获得了粉红粘帚霉全基因组的序列信息,进而为新型酶基因的研究奠定了基础。本研究通过采用氨基酸序列比对方式,并结合相关序列的功能注释信息,从粉红粘帚霉全基因组中挖掘到了5个相关酶的基因(糖化酶基因g3440,内切葡聚糖酶基因45家族g8456和g1028,内切葡聚糖酶基因5家族g204,过氧化氢酶基因g2092)。为了实现分泌型表达,对各基因编码氨基酸的序列进行了信号肽检测,证实了5个基因的氨基酸序列均含有信号肽。本实验采用基因工程技术手段,构建了5个基因的pGm重组质粒,并将其分别转化黑曲霉G1进行重组表达。获得了三个基因的成功表达,其分别是：糖化酶基因g3440,内切葡聚糖酶基因g1028,过氧化氢酶基因g2092。测定了三种酶粗酶液的活性及相关酶的性质,结果表明：糖化酶活性达292.85 U/mL,最适温度和pH分别为50℃和5.0,该酶的耐热性较差,pH稳定性较好；内切葡聚糖酶活性达218.17 U/mL,最适温度和pH分别为55℃和6.0；过氧化氢酶活性达640.15U/mL,最适温度和pH分别60℃和6.0。