由于臭氧层的破坏,紫外线(Ultraviolet,UV)到达地面的强度越来越大。人体皮肤过度暴露于紫外线下会导致皮肤光损伤,包括急性损伤和慢性损伤。其中,慢性光损伤对人类皮肤所造成的伤害是持续性的、短时间内不易察觉的、甚至有可能是不可逆的,它与我们的健康息息相关。矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(Cyanidin-3-O-glucoside,C3G)是一种广泛存在于果蔬中的黄酮类化合物,具有很强的抗氧化及抗炎等生物活性,是防护UV诱导的皮肤慢性光损伤的潜在物质。本课题主要采用UVA+UVB混合UV模拟日光照射雌性小鼠,分别通过喂食以及涂抹C3G进行干预,探讨C3G对皮肤慢性光损伤的保护作用及其机制。通过对4-6周龄的雌性小鼠进行每两天一次的UVA+UVB混合UV辐照,对小鼠背部皮肤造成慢性光损伤,同时给予小鼠膳食摄入C3G(1000 mg/kg)或在小鼠背部皮肤涂抹浓度为5 mg/m L的C3G乳霜,实验持续13周。实验结束后,对小鼠进行拍照,并且获取血清、皮肤组织,测定相关指标。(1)观察小鼠皮肤的外观变化,测定表征皮肤屏障功能的相关指标,通过苏木素-伊红染色观察小鼠皮肤组织的病理变化。(2)通过酶联免疫吸附试验和试剂盒测定皮肤中相关抗氧化酶含量及脂质过氧化产物含量,评价C3G对皮肤抗氧化系统的保护作用;利用免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)对皮肤的DNA氧化损伤标志物进行测定、采用TUNEL荧光进行凋亡测定、采用蛋白免疫印迹对皮肤细胞凋亡相关蛋白表达进行分析,探究C3G对氧化损伤介导的DNA损伤的保护作用。(3)通过采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q PCR)、IHC、免疫荧光(Immunofluorescence,IF)分析小鼠皮肤中炎症相关基因的表达及炎症细胞浸润情况,探索C3G对UV导致的炎症的保护作用。(4)采用Masson染色观察皮肤真皮层胶原纤维的情况,采用羟脯氨酸试剂盒测定胶原蛋白的含量,并通过IHC和q PCR来测定胶原蛋白合成和降解相关基因的表达,探讨C3G对UV破坏胶原蛋白的稳态的改善作用机制。结果表明,UV辐照之后,小鼠皮肤出现了粗糙变硬、失去光泽、表皮增生、太阳疤痕等现象,同时,UV也增加了经皮水分流失,而膳食摄入或涂抹C3G后,小鼠的皮肤外观得到了改善,皮肤屏障功能也得到了一定的修复。膳食摄入C3G或涂抹C3G都能通过改善皮肤的抗氧化系统来减少UV诱导的脂质过氧化产物以及DNA的氧化性损伤。此外,膳食摄入或涂抹C3G均可显著性降低UV诱导的炎症相关基因的表达以及炎症细胞的浸润。小鼠背部皮肤暴露于UV辐照之后,皮肤的胶原纤维会出现排列紊乱及异常沉积的现象,膳食摄入或涂抹C3G均可以通过调节胶原蛋白的合成和降解来改善胶原纤维异常沉积现象。本研究成果表明膳食摄入或涂抹C3G均可以发挥保护皮肤慢性光损伤的作用,为研究花色苷保护皮肤慢性光损伤提供理论依据。