HIF-1、VEGF在实验性大鼠子宫内膜异位症的表达及疏肝理气温阳化瘀法对其影响

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目的:子宫内膜异位症(Endometriosis,Ems),也称为内异症,在临床上是育龄期妇女的常见病和多发病之一,严重影响患者的生活质量,近年来发病率有明显增高的趋势。内异症定义为具有活性的子宫内膜组织(腺体和间质)出现在子宫内膜以外部位时导致的一种疾病。持续加重的盆腔粘连、疼痛、不孕是患者主要临床表现。关于内异症的确切发病机制目前还未完全阐明。内异症是一种具有肿瘤生物学特性的良性疾病。缺氧诱导因子(HIF-1)在处于缺氧微环境的细胞适应反应过程中起着重要的调控作用,开启了肿瘤血管的生成环节。VEGF是血管生成中的关键性促进因子,加快形成新生血管。缺氧在众多调控VEGF表达的因素中处于核心位置。本课题拟通过动物实验研究分析HIF-1、VEGF在内异症在位内膜、异位内膜的表达,以探讨内异症的部分发病机制;并对实验性大鼠采用疏肝理气温阳化瘀法进行治疗,探讨疏肝理气温阳化瘀法治疗内异症的疗效及作用机理。方法:选用正常动情周期的健康清洁级Wistar雌性成年大鼠70只,体重200±20g,将70只大鼠随机选取20只分为正常组、假手术组(每组各10只),其余根据王艳萍[1]方法复制子宫内膜异位症大鼠模型。将造模成功的大鼠按随机数字表法分为4组:中药治疗高剂量组(简称“高剂量组”)、中药治疗低剂量组(简称“低剂量组”)、模型对照组(简称“模型组”)、丹那唑治疗组(简称“西药组”),每组10只。中药低、高剂量组分别按15.41g/kg、61.76g/kg(分别相当于临床成人剂量的5倍、20倍)给予疏肝理气温阳化瘀中药灌胃,每日一次,连用4周;西药组按100mg/kg/d给予丹那唑水溶液灌胃,连用4周;模型组、假手术组及正常对照组给予同体积的生理盐水。末次给药后,选择动情期的大鼠禁食8小时,断头处死,无菌操作剖腹取出异位内膜组织,正常组、假手术组取子宫内膜组织,进行免疫组织化学染色,测定组织中HIF-1、VEGF的含量;另取该部分组织用于测定HIF-1mRNA、VEGF含量。结果:1 HIF-1的表达:HIF-1、HIF-1mRNA阳性表达主要在异位内膜腺上皮细胞的胞浆中,个别在间质细胞中少量表达。模型组HIF-1的表达高于正常组,组间比较具有统计学意义(P<0.05);模型组HIF-1的表达高于假手术组,组间比较具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组和中药低剂量组HIF-1的表达均低于模型组,中药高、低剂量组与模型组比较均具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组HIF-1的表达低于西药组,组间比较具有统计学意义(P<0.05);中药低剂量组HIF-1的表达与西药组比较无统计学意义(P>0.05);中药高、低剂量组HIF-1的表达与正常组比较均无统计学意义(P>0.05);HIF-1在中药高、低剂量组间比较无统计学意义(P>0.05)。2 VEGF的表达:VEGF主要定位于腺上皮细胞的细胞浆中,间质细胞浆中少量表达,VEGF mRNA存在于腺上皮细胞的胞浆中。模型组VEGF的表达高于正常组,组间比较具有统计学意义(P<0.05);模型组VEGF的表达高于假手术组,组间比较具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组和中药低剂量组VEGF的表达均低于模型组,中药高、低剂量组与模型组表达比较均具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组VEGF的表达低于西药组,组间比较具有统计学意义(P<0.05);中药低剂量组VEGF的表达与西药组比较无统计学意义(P>0.05);中药高、低剂量组VEGF的表达与正常组比较均无统计学意义(P>0.05);VEGF在中药高、低剂量组间比较无统计学意义(P>0.05)。结论:1 HIF-1、VEGF在子宫内膜异位症的发生过程中起着重要作用。2 VEGF、HIF-1mRNA在子宫内膜异位症组织中表达上调呈一定协同性;缺氧环境是诱导VEGF、HIF-1表达协同上调的原因之一。3 HIF-1与VEGF可能共同促进了内异症血管的生成。4疏肝理气温阳化瘀中药可以降低内异症子宫内膜组织中升高的HIF-1、VEGF的水平,提示该法可通过调节病灶局部HIF-1、VEGF水平,起到治疗内异症的作用。
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