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目的:系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种有多系统损害的慢性自身免疫性疾病,同时其血清具有以抗核抗体为代表的多种自身抗体,自然病程多表现为病情的加重与缓解交替。狼疮肾炎(Lupus nephritis,LN)是SLE常见且严重的并发症,表现为血尿、蛋白尿、脓尿、管型尿及肾功能的下降,严重时可发展为急性肾衰竭或终末期肾脏病,有较高的发病率和死亡率。肾组织活检目前仍是诊断LN及LN病理分型的金标准,对治疗具有重要的指导意义,但这项创伤性的检查方法在实际临床工作开展中存在一定的局限性。近年来,随着稳定的RNA抽提技术以及实时荧光定量PCR(real-time fluorescence PCR)技术的发展成熟,检测尿沉渣细胞m RNA(messenger RNA)的水平成为研究SLE和LN新的生物标志物的无创技术平台。人肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(Tumor necrosis factor like weak inducer of apoptosis,TWEAK)是肿瘤坏死因子家族中的一个新成员,TWEAK与其受体成纤维细胞生长因子诱导14(Fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)结合在多种细胞与组织中表达,通过活化NF-κB通路刺激多种细胞因子、趋化因子和细胞黏附分子的产生,发挥多种生物学活性,包括细胞凋亡、细胞增殖、促炎活性以及血管再生,可能通过多种途径参与SLE以及LN的发病过程。因此,本研究的目的在于:1、利用real-time PCR技术检测SLE患者尿液TWEAK、Fn14、MCP-1 m RNA水平,并与评估狼疮活动常用的临床指标进行相关性分析;探讨SLE患者检测尿液TWEAK、Fn14、MCP-1 m RNA水平的价值。2、通过免疫组化方法研究不同病理类型LN患者肾脏病理组织中TWEAK、Fn14的表达水平和分布部位,观察其与局部浸润免疫细胞之间的关系,探讨TWEAK/Fn14在LN发病中的作用。方法:1、本研究以活动性SLE患者31例(其中确诊为活动性狼疮肾炎患者15例,无肾脏受累的SLE患者16例)及健康对照者作为研究对象。收集研究对象尿液细胞,提取总RNA并进行逆转录,利用real-time PCR技术检测尿液TWEAK、Fn14以及MCP-1 m RNA水平并评估其与临床指标间的相关性。2、选取40例LN肾穿刺组织标本,采用免疫组化检测LN患者和对照组的肾组织蜡块的CD3、CD20、CD68、TWEAK和Fn14表达,初步探讨TWEAK、Fn14与LN肾脏病理中浸润的炎性细胞的关系。3、对31例活动性SLE患者随访3年,观察病情转归,研究基线和三年后尿液TWEAK、Fn14m RNA水平与治疗反应的关系。结果:1、活动性LN患者尿液TWEAK、Fn14以及MCP-1 m RNA水平显著升高,并与24小时尿蛋白定量、SLEADI、抗ds DNA抗体滴度等临床指标显著相关。ROC曲线评估显示三种m RNA能区分SLE患者肾脏受累与无肾脏受累及健康对照。。2、TWEAK、Fn14广泛表达于各型LN的肾小管上皮细胞胞浆中,部分肾小球系膜细胞、内皮细胞、毛细血管壁有少量表达。Ⅲ型、Ⅳ型LN患者TWEAK、Fn14表达水平较Ⅱ型、Ⅴ型显著多,以Ⅳ型LN表达最高。TWEAK表达水平与Fn14水平、CD3、CD20、CD68阳性细胞数量均呈正相关。3、ROC曲线评估提示基线的尿液Fn14 m RNA、抗ds DNA抗体滴度以及SLEDAI能预测SLE患者对常规治疗的反应。SLE患者基线尿液Fn14m RNA水平越高,对常规治疗反应越差。SLE患者治疗后尿液TWEAK、Fn14 m RNA水平越高,治疗反应越差。结论:1、SLE尿液TWEAK、Fn14和MCP-1 m RNA水平增高提示活动性肾脏受累,尿液TWEAK、Fn14和MCP-1 m RNA可能成为反映SLE患者肾脏受累的生物标志物。2、TWEAK、Fn14广泛表达于各型LN的肾小管上皮细胞胞浆中,部分肾小球系膜细胞、内皮细胞、毛细血管壁有少量表达。Ⅳ型LN表达最高。TWEAK、Fn14表达水平与肾脏浸润的CD3、CD20、CD68阳性细胞数量密切相关。提示TWEAK/Fn14途径可通过诱导炎性细胞浸润参与LN病理过程。3、SLE患者基线尿液Fn14m RNA水平越高或尿液TWEAK、Fn14 m RNA水平持续升高,提示对常规治疗反应越差,尿液TWEAK、Fn14 m RNA检测可能成为预测SLE治疗反应的生物标志物。