青少年特发性脊柱侧凸血清MicroRNA的筛查及成人脊柱退行性疾病的相关临床研究

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第一章 青少年特发性脊柱侧凸血清MicroRNA的筛查目的:本研究的目的在于探讨人外周血清miRNA是否可以作为生物学标记预测AIS的发生发展。方法:选取10例女性青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者与10例性别、年龄匹配的正常人群血清。提取血清总RNA,样本质量检测合格后,利用HiSeq深度测序技术对AIS患者和正常人外周循环中的MicroRNA进行全基因组测序。筛选出具有显著差异表达的miRNA,其筛选标准为:上调的Foldchange值>2,P值<0.05;下调的Foldchange值<0.5,P值<0.05。通过查询miRbase数据库对差异的niRNA进行序列分析;在Pumbmed以及NCBI数据库查询靶基因位点注释信息。结合目前已有AIS病因学研究成果,选取可能的目标miRNA。再选取AIS与正常对照各60例,利用qRT-PCR技术对筛选出的目标miRNA表达量进行进一步验证。采用独立样本t检验,比较目标miRNA表达量在两组间的差异。P<0.05认为具有统计学意义。结果:根据两组miRNA表达量的差异,以Foldchange>2和P值<0.05为筛选条件,共选出AIS上调miRNA有72个,下调miRNA有73个。根据每个miRNA靶基因的预测以及相关细胞间信号传导通路的查询,结合目前已知的AIS病因学研究资料筛选出可能的目标miRNA共14个。其中选取上调miRNA11个,分别为:hsa-miR-223-3p, hsa-miR-9-5p, hsa-miR-28-5p, hsa-miR-27a-3p, hsa-miR-31-5p, hsa-miR-219a-1-3p, hsa-miR-142-3p, hsa-miR-17-5p hsa-miR-204-5p, hsa-miR-148b-3p, hsa-miR-144-5p;选取下调miRNA 3个,分别为:hsa-miR-183-5p, hsa-miR-130b-3p, hsa-miR-375。经过qRT-PCR技术验证未发现筛选出的可能目标miRNA在两组间的表达量差异。结论:本研究首次对AIS患者进行血清miRNA的比对研究,尚未发现可疑miRNA在AIS患者血清中的异常表达。血清miRNA对AIS的预测价值尚不肯定,需要进一步研究。研究资料筛选出可能的目标miRNA共14个。其中选取上调miRNA11个,分别为:hsa-miR-223-3p, hsa-miR-9-5p, hsa-miR-28-5p, hsa-miR-27a-3p, hsa-miR-31-5p, hsa-miR-219a-1-3p, hsa-miR-142-3p, hsa-miR-17-5p hsa-miR-204-5p, hsa-miR-148b-3p, hsa-miR-144-5p;选取下调miRNA 3个,分别为:hsa-miR-183-5p, hsa-miR-130b-3p, hsa-miR-375。经过qRT-PCR技术验证未发现筛选出的可能目标miRNA在两组间的表达量差异。第二章 成人峡部裂性腰椎滑脱患者脊柱-骨盆矢状面参数变化及其临床意义目的:观察成人峡部裂性腰椎滑脱患者脊柱骨盆矢状面参数的变化,探讨L5入射角与腰椎滑脱程度的相关性。方法:回顾性分析60例L5/S1峡部裂性滑脱患者,年龄28~69岁(平均47岁);以77例年龄(25~63岁,平均43.5岁)匹配的正常成人为对照组。在站立位全脊柱侧位X线片上测量L5滑移距离(slip distance,SD)、L5滑移百分比(slipping percentage, SP)以及骨盆入射角(pelvic incidence, PI)、骨盆倾斜角(pelvic tilt, PT)、骶骨倾斜角(sacral slope, SS)、L5入射角(L5 incidence, L5I)、腰骶角(lumbar-sacral angle, LSA)、腰椎前凸角(lumbar lordosis, LL)、矢状面平衡(Sagittal Vertical Axis, SVA)等脊柱骨盆矢状面参数。根据滑移百分比将滑脱组患者分成两组:A组,轻度滑移组(SP≤30%)30例;B组:重度滑移组(SP>30%)30例。采用独立样本t检验比较滑脱组与对照组及滑脱组内A、B组之间的差异,并用Pearson相关性分析对滑脱患者脊柱骨盆参数与滑脱程度(SP)进行相关性分析。结果:滑脱组PI、PT、SS、LL均显著大于正常对照组,LSA显著小于对照组(p<0.05)。轻度滑移组(A组)L5I与对照组相比无显著差异,重度滑移组(B组)L5I显著大于对照组(P<0.05)。重度滑移组PI、PT、SS、L5I显著大于轻度滑移组,LSA显著小于轻度滑移组(P<0.05)。滑脱组滑移百分比与PI、PT、 SS、SVA均呈正相关,与LSA呈负相关(P<0.05)。轻度滑移组滑移百分比与L5I未见显著相关性;重度滑移组L5I和SVA与滑移百分比的正相关性具有统计学意义(P<0.05)。滑脱组L5I与PI呈正相关,与LSA呈负相关。结论:成人峡部裂性腰椎滑脱患者脊柱-骨盆矢状面参数与正常人相比PI、PT、 SS、LL均较大。滑移百分比大于30%患者的L5I明显增大,并与滑脱程度显著性相关,治疗时应重视对L5I的恢复重建。并用Pearson相关性分析对滑脱患者脊柱骨盆参数与滑脱程度(SP)进行相关性分析。第三章 成人腰椎峡部裂性滑脱局部稳定性对脊柱-骨盆矢状面形态的影响目的 探讨成人峡部裂性滑脱患者腰椎稳定性对脊柱-骨盆矢状形态的影响。方法 回顾性分析2011年12月至2013年9月在我院收治的59例L5/S1峡部裂性滑脱的患者,平均年龄45.9岁(27-59岁)。根据侧位腰椎过伸、过屈位椎体矢状面的滑移距离分为动态性滑脱组与静态性滑脱组。动态性滑脱的定义为侧位腰椎过屈片上L5椎体滑移距离与侧位腰椎过伸位片上L5椎体的滑移距离的差值d大于或等于3mm,反之则为静态性滑脱。测量参数包括矢状面平衡(SVA)、胸椎后凸(TK)、腰椎前凸(LL)、骨盆投射角(PI)、骶骨倾斜角(SS)、骨盆倾斜角(PT)、腰骶角(LSA)以及滑移的距离(SD)、滑移百分比(SP)及各患者腰椎动力位片中滑移距离差值。运用疼痛觉模拟评分法(VAS)评估两组患者腰痛程度。采用独立样本t检验比较两组间脊柱-骨盆矢状面参数的异同。结果59例患者中20位为动态性滑脱(占33.9%),39位为静态性滑脱(占66.1%)。腰椎动力位片中两组患者d值分别为5.1mm和1.1mm。 VAS腰痛评分动态组为7.0,静态组为4.3(P<0.05)。动态滑脱组SD、SP的均显著高于静态滑脱组(P<0.05)。脊柱-骨盆参数中,除PI、SS及L5I在动态滑脱组明显大于静态滑脱组外,其余脊柱骨盆参数(SVA,TK,LL,PT,LSA)在两组间均无显著差异(P>0.05)。结论在成人腰骶部峡部裂性滑脱患者中,部分患者(33.9%)腰椎失稳相对严重可视为动态性滑脱,这类患者一般滑脱程度较高,可能与较高的PI及L5I有关。不过,腰椎失稳状态相对严重时并不会引起滑脱患者脊柱-骨盆矢状面形态发生明显改变。斜角(PT)、腰骶角(LSA)以及滑移的距离(SD)、滑移百分比(SP)及各患者腰椎动力位片中滑移距离差值。运用疼痛觉模拟评分法(VAS)评估两组患者腰痛程度。采用独立样本t检验比较两组间脊柱-骨盆矢状面参数的异同。第四章长、短节段融合内固定治疗成人退变性脊柱侧凸并发症分析目的 探讨长、短节段融合内固定治疗退变性脊柱侧凸的并发症。方法 回顾性研究2007年1月至2012年2月,我院收治的94例DS并接受后路融合手术患者的临床及影像学资料。其中,长节段固定66例(70.2%),男11例,女55例,平均年龄(59.1±9.9)岁,术前侧凸Cobb’s角平均(39.3±9.1)°;短节段固定28例(29.8%),男5例,女23例,平均年龄(62.7土12.2)岁,术前侧凸Cobb’s角平均(18.5±6.4)°。评估指标:年龄、性别、减压节段、融合节段、术中出血量、手术时间、术后住院时间,冠状面Cobb’s角及整体平衡状态,早期(<术后3个月)和晚期(≥术后3个月)并发症所占比例。结果两组在年龄、性别与减压节段上差异无统计学意义(P=0.081、0.412和0.067)。长节段融合固定组平均融合固定节段(11.1±5.5)个,术后侧凸Cobb’s角平均(13.3±6.5)°;短节段融合固定组平均融合固定节段(3.8±3.2)个,术后侧凸Cobb’s角平均(8.8±6.7)。。长节段固定组的手术时间、术中出血量以及术后住院时间[分别为(260.8±35.6)min, (2788.0±63.8)ml,(6.7±5.5)天]明显大于短节段固定组[分别为(188.3±20.7)min, (1642.0±49.9)ml, (4.9±3.8)天],差异有统计学意义(P<0.05)。长节段固定组早期、晚期及总体并发症发生率分别为9.1%、28.8%和37.9%;短节段固定组早期、晚期及总体并发症发生率分别为3.6%、25.0%和28.6%。长节段固定组最常见的并发症为内固定断裂(8例,12.1%)与冠状面整体失平衡(6例,9.1%);短节段固定组则易出现侧凸进展(2例,7.1%)与近端临近节段病变(2例,7.1%)。结论虽然短节段融合内固定围手术期并发症发生率低,但易出现侧凸进展、临近节段退变等并发症;长节段融合内固定虽然能够显著改善畸形,但手术时间长、术中出血量大,远期随访过程中出现躯干倾斜及断棒等并发症的风险较高。
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