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目的研究抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)体外对卵巢癌HO8910细胞增殖及凋亡的影响,了解PDTC体外抗卵巢癌作用及其机制,为PDTC在卵巢癌治疗提供重要的实验室基础和理论依据。方法1.采用四甲基偶氮哇蓝(MTT)法,分别检测不同浓度PDTC, DDP和联合应用PDTC与DDP对HO8910细胞生长抑制的影响。2.采用吖啶橙和溴化乙啶双荧光染色法观察凋亡细胞。3.采用流式细胞仪检测不同浓度PDTC作用HO8910后的细胞凋亡率。4.免疫组化法测定PDTC作用后卵巢癌HO8910细胞IKKβ、NF-κB、XIAP、Bcl-2以及caspase-3表达的影响。结果1.PDTC浓度为25μM、50μM、100μM和200μM时,作用12、24、36h均明显抑制HO8910细胞的增殖,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),并具有时间、剂量依赖性。12、24、36h, HO8910的半数抑制率IC50所需的PDTC浓度分别为393.2836、340.9378、275.7231μmol/L。2.顺铂联合应用PDTC时能显著提高顺铂杀伤卵巢癌细胞作用。单用DDP 0.75μg/ml、1.5μg/ml、3.0μg/ml和6.0μg/ml作用24h时,细胞生长抑制率仅为9.22%、19.9%、37.39%和66.72%,25μM PDTC预处理1h后加入DDP使作用终浓度达到0.75μg/ml、1.5μg/ml、3.0μg/ml和6.0μg/ml作用24h后其细胞生长抑制率则为18.61%、37.23%、65.78%和88.03%,联合应用PDTC和DDP与单用DDP对卵巢癌细胞的生长抑制率相比,差异有显著性(P<0. 05)。3.将PDTC与细胞共同作用后,经吖啶橙/溴化乙啶双荧光染色观察可见中晚期凋亡细胞呈橘红色或红色,染色质凝集,染色均匀,细胞核变小,可见凋亡小体。4.采用流式细胞仪检测不同浓度PDTC诱导凋亡作用,当PDTC浓度为25μM、50μM、100μM时,作用HO8910 24h小时后,细胞凋亡率分别为4.38%、8.13%、17.16%,与对照组比较及三组之间比较差异有显著性(P<0.01)。5.免疫组化法显示PDTC浓度为10,100μM作用24h小时后细胞浆中NF-κB、IKKβ表达无显著性变化,caspase-3增加,Bcl-2、XIAP及细胞核中表达NF-κB下调,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论1. PDTC能有效抑制卵巢癌HO8910细胞增殖。2.PDTC能诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡,其治疗肿瘤机制可能是通过抑制NF-κB活性并下调XIAP,Bcl-2表达,促进caspase-3活化而抑制肿瘤生长和诱导肿瘤细胞凋亡。3.抗氧化剂PDTC能够增强顺铂化疗作用,提高疗效。4.抗氧化剂PDTC有望为卵巢癌辅助治疗带来新的前景。