涎腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)具有嗜神经侵袭的特性，寻求ACC嗜神经侵袭的生物学标志并明确其机制具有重要的临床意义。目前尚无关于神经营养素及其受体在ACC中的表达以及它们对ACC细胞侵袭能力的影响报道。 目的：明确神经营养素及其受体在ACC中的表达情况，并筛选出与ACC嗜神经侵袭有关的因子或受体。通过体外实验观察神经营养素对ACC细胞侵袭能力的影响。为研究ACC嗜神经侵袭的机制，控制ACC对神经的侵袭提供理论依据。 方法：1．免疫组化染色：收集ACC石蜡组织块32—33例，根据嗜神经侵袭的病理现象划分为未见嗜神经现象组和存在嗜神经现象组，选正常腮腺5—7例、腺泡细胞癌3例作对比研究。进行两种神经营养素(NGF和NT-3)及两种受体(TrkA和TrkC)的免疫组化染色后，观察染色的阳性细胞比例和强度，并了解患者有无神经受累症状或体征。统计学分析采用Fisher确切概率法，明确它们的表达是否与ACC嗜神经侵袭有关。另外观察了 第四军医大学硕士学位论文这四种因子及受体在人涎腺ACC细胞系SACC一83中的表达。2.体外粘附实验:培养板的底面覆以Matrigel，将SAcc一83细胞与不同浓度的NGF共培养后以MTT比色法测定粘附率，进行t检验。将结果与人舌癌细胞系TCA一8 113作对比。3.体外移动实验:利用侵袭小室观察不同浓度的NGF对SACC一83细胞系通过微孔膜向下室运动数目的影响。4.体外侵袭实验:在侵袭小室的上室覆以Matrigel后，观察不同浓度的NGF对SACC一83细胞系侵袭Matrigel后向下室运动数目的影响。结果:1.NGF、NT一3、TrkA及TrkC在ACC石蜡切片中的阳性表达率均大于90%，存在嗜神经现象组的表达水平显著高于未见嗜神经现象组，阳性细胞在筛孔、管状型的主要位于腺样结构，在实性型呈散在分布。NGF、NT一3、TrkA在沿神经周围分布的癌细胞染色强度明显高于远离神经者， TrkC无此特点。存在疼痛组的NGF表达水平显著高于无疼痛组。嗜神经侵袭病理表现与神经受累症状或体征不一致。正常腮腺的导管细胞为弱至中等强度染色;腺泡细胞癌细胞染色为阴性;在SACC一83细胞玻片中，NGF和NT一3为中等至强染色，TrkA和TrkC为弱至中等染色，且阳性细胞比率均为+++。2.不加入NGF时，SACC一83细胞系和TCA一8 113细胞系在Matrigel上的粘附率均明显大于相同时间内直接在培养板表面的粘附率。铺有Matrigel时，sAcc一83细胞与25ng/ml浓度的NGF共培养90min和与5，25ng/ml浓度的NGF共培养6h后的粘附率均明显比同期内未加NGF组高，而在TCA一8 113细胞系未观察到这种差异。3.与浓度为5，25，SOng/ml的NGF共培养后，向下室发生移动的SACC一83细胞数目显著多于不与NGF共培养者。4.与浓度为25，50ng/ml的NGF第四军医大学硕士学位论文共培养后，SACC一83细胞侵袭并穿过Matrigel的数目明显增多;而与浓度为SO0ng/ml的NGF共培养后，穿过Matrigel的细胞数却明显减少，故NGF对SACC一83细胞系侵袭Matrigel能力的影响具有浓度依赖性。结论:1.首次提出NGF、NT一3、TrkA及TrkC均可能作为ACC嗜神经侵袭生物学标志，它们在ACC中的过表达可能是ACC嗜神经侵袭的机制之一。2.首次发现一定浓度的NGF能够促进SACC一83细胞系的体外粘附、移动及侵袭能力，推测出NGF可能在ACC嗜神经侵袭中起重要作用。