幼年亚急性苯并芘暴露引起大鼠成年后神经行为和小脑代谢组学变化

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第一部分出生后亚急性暴露苯并芘(BaP)对成年期大鼠神经行为和小脑神经结构的影响目的:通过对出生后亚急性暴露BaP模型的建立,观察出生后亚急性暴露BaP对大鼠成年期早期小脑相关神经行为和小脑神经结构的影响。方法:34只出生后4天的SD雄性幼鼠及其母鼠,同时购置于重庆医科大学动物中(编号SCXK(YU)2007-0001),并饲养于标准实验中。用无毒的染料在幼鼠身上和脚上进行标记,并随机分为对照组和BaP暴露组(2mg/kg)。按照分组及其体重连续7周每天灌胃一次,对照组暴露同等剂量的花生油。染毒7周后,旷场试验被用于评估大鼠的自主行为活动,探索性行为活动以及紧张度。电镜结果用于检测小脑组织的神经元超微结构的改变。结果:与对照组相比,BaP暴露组大鼠自主运动总路程增加有统计学意义(t=6.039,P<0.000),但是自主运动总时间无统计学意义(t=0.077,P=0.940)。此外,大鼠中间区域运动次数(t=2.263,P=0.040)和直立次数(t=2.426,P=0.029)与对照对照组相比有明显的增多,且差异有统计学意义。电镜结果显示,BaP暴露组大鼠的小脑组织与对照组比较,出现明显的神经细胞肿胀的特。肿胀的神经元细胞存在有明显的肿胀、变形的线粒体和扩张的内质网。结论:出生后BaP的亚急性暴露能够引起大鼠成年期早期神经行为学的改变和小脑神经元超微结构的异常。第二部分出生后亚急性暴露苯并芘(BaP)对成年期大鼠小脑代谢的影响目的:通过GC-MS对BaP暴露后的小脑进行代谢的测量,并分析代谢组学的数据,探讨BaP对小脑代谢水平的影响。方法:采用GC-MS对小脑组织进行测量。对测出的代谢组数据根据其内参和重量进行标准化,对标准化的数据先进行PCA分析后,再进行PLS-DA分析。PCA分析用于观察所有样本的代谢物质的分布情况,PLS-DA分析用于区分对照组和BaP暴露组之间的代谢物质的差异情况,同时通过PLS-DA分析得出VIP值。再通过两样本t检验检测两组之间代谢物质是否存在显著差异,P<0.05差异有显著性。利用VIP值和P<0.05筛选出有意义的代谢物质。利用Metaboanalyst分析网站和Metscape软件分析BaP影响的主要代谢途径。结果:GC-MS测试出120种代谢组织,经分析筛选出20个有差异的代谢产物。20个代谢产物主要与能量代谢,蛋氨酸代谢,谷胱甘肽代谢有关。结论:BaP暴露能够引起小脑的代谢紊乱,通过影响小脑能量代谢,蛋氨酸代谢和谷胱甘肽代谢导致小脑神经功能的异常。
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