目的: 我国是食管癌的高发国家，而河北省太行山区与广东省潮汕地区是我国食管癌的高发地区。食管癌的发生是多种癌基因的激活与抑癌基因的失活长期协同作用的结果。基因异常甲基化是目前所知的除突变、缺失和移位之外的另一种基因异常改变，与其它基因异常相比，基因的甲基化研究不仅对恶性肿瘤的病因、早期诊断及预后评价有很大价值，而且对肿瘤的基因治疗研究有着重要的作用。目前已知，MT-3基因是细胞内一种金属硫蛋白的编码基因，不仅具有许多重要的生理功能，还可以抑制细胞增殖，已有研究发现MT-3基因在食管癌和胃癌中均存在异常甲基化。本课题应用MSP和RT-PCR方法检测河北地区和潮汕地区新鲜食管癌标本及非高发区正常人食管组织中的MT-3基因甲基化对MT-3基因mRNA表达的影响，以期揭示MT-3基因甲基化在不同区域食管癌发生、发展中的作用。 方法: 1选取10例正常人血液有核细胞和10例胎儿食管组织，应用MSP技术，对其MT-3基因CpG岛甲基化的情况进行研究，旨在揭示正常人血液有核细胞和胚胎组织中MT-3基因甲基化情况。 2选取20例非食管癌高发区正常人食管组织标本，应用MSP技术，对其MT-3基因CpG岛的甲基化情况进行研究，从而了解正常人群中MT-3基因CpG岛的甲基化情况。 3应用MSP技术和RT-PCR技术对30例河北地区食管癌患者新鲜手术标本及切缘正常组织及30例潮汕地区食管癌患者新鲜手术标本及切缘正常组织进行MT-3基因CpG岛甲基化情况和MT-3基因mRNA表达量的研究，以阐明MT-3基因CpG岛的甲基化和MT-3基因mRNA表达与食管癌发生发展的关系，及食管癌及正常组织中MT-3基因甲基化在南北地区差异。 结果: 1.MT-3基因CpG岛在正常人血液有核细胞及胎儿食管组织中无甲基化。 2非高发区正常人食管组织MT-3基因CpG岛有少量的甲基化。与高发区人群中食管正常切缘组织标本比较，两者之间差异有显著性P=0.043。 3.MSP结果显示河北地区食管癌组织和正常切缘组织标本中MT-3基因启动子区CpG岛甲基化率分别为83％(25/30)和36.6％(11/30)。两者之间有统计学意义P=0.00。潮汕地区食管癌组织和正常切缘组织标本中MT-3基因启动子区CpG岛甲基化率分别为80％(24/30)和30％(9/30)。两者之间有统计学意义P=0.00。但两地区之间比较无统计学意义。 4综合MSP和RT-PCR结果可得出MT-3 mRNA表达率在MT-3基因CpG岛甲基化的肿瘤组织与MT-3基因CpG岛非甲基化的肿瘤组织分别为23％和71％，即甲基化的肿瘤组织中MT-3基因mRNA表达率低于非甲基化组织，二者比较有统计学意义P=0.035。 5 RT-PCR结果显示河北地区标本中MT-3基因在食管癌肿瘤组织表达明显低于正常组织。潮汕地区标本中MT-3基因在食管癌肿瘤组织表达亦明显低于正常组织。但两地区之间比较无统计学意义。 6 MT-3的甲基化与患者的性别、年龄、组织分化、肿瘤侵犯深度和肿瘤的分期等临床病理资料参数之间均无关。 结论: 1正常人血液单核细胞及胎儿食管组织中MT-3无甲基化。 2非高发区正常人群食管组织中MT-3有少量甲基化，考虑为年龄因素所致。高发区人群食管正常切缘组织甲基化比非高发区人群食管组织甲基化比率高，说明高发区的某些环境因素刺激可导致MT-3基因甲基化。 3.MSP结果证实河北地区和潮汕地区食管癌组织中MT-3基因启动子区CpG岛甲基化程度明显高于食管切缘正常组织，即食管癌组织中MT-3基因启动子区CpG岛广泛存在甲基化。但两地区之间MT-3基因启动子区CpG岛甲基化程度比较无差异。表明不同的生活环境均可促使MT-3甲基化的发生。 4 RT-PCR结果表明河北地区和潮汕地区食管癌组织标本中MT-3基因mRNA的表达量均低于食管正常切缘组织标本，即食管癌组织中广泛存在MT-3蛋白表达水平下降，说明MT-3基因CpG岛的甲基化与食管癌的发生和发展确实存在必然联系。而两地区之间MT-3基因mRNA水平相似，说明MT-3蛋白在食管癌发生发展中发挥的作用具有普遍性。