【摘 要】
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沙门菌在环境中普遍存在,引起人畜共患沙门菌病,主要通过动物源食品感染人类。近年来,沙门菌耐药性愈发严重,整体耐药种类呈不断增加趋势,尤其是耐三代头孢菌株,提高了临床治疗失败等风险,对低免疫人群有极大潜在危害。本研究调查了肉鸭屠宰链中耐三代头孢沙门菌(Third-generation-cephalosporin resistant Salmonella,3GC-RS)的存在情况,并对该表型的菌株进行
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沙门菌在环境中普遍存在,引起人畜共患沙门菌病,主要通过动物源食品感染人类。近年来,沙门菌耐药性愈发严重,整体耐药种类呈不断增加趋势,尤其是耐三代头孢菌株,提高了临床治疗失败等风险,对低免疫人群有极大潜在危害。本研究调查了肉鸭屠宰链中耐三代头孢沙门菌(Third-generation-cephalosporin resistant Salmonella,3GC-RS)的存在情况,并对该表型的菌株进行了耐药性、耐药基因、毒力基因调查并进行聚类分型,为生产管理、临床治疗和流行病学调查提供参考,主要结果如下按流水线生产工艺先后顺序,从四川省某大型肉鸭屠宰场生产线获取样本867份,共分离出242株沙门菌,总体污染率为27.9%。使用头孢噻肟和头孢他啶两种药物对沙门菌分离株进行纸片扩散法药物敏感性试验,242株受试沙门菌中至少耐其中一种药物的有65株,即3GC-RS菌株,分离率26.9%,主要血清型为S.Indiana(n=23)和S.Give(n=11),其次是S.London(n=6)和S.Typhimurium(n=5)。65株耐三代头孢沙门菌中,产超广谱β-内酰胺酶表型共35株,主要来自2016~2017年;产Amp C酶表型共21株,主要来自2018~2019年。3GC-RS菌株对多西环素、四环素、链霉素和氨苄西林的耐药率极高,分别为90.8%、86.2%、84.6%和80%,对氨曲南、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶、环丙沙星、庆大霉素耐药率分别为63.1%、63.1%、60%、55.4%,对阿莫西林/克拉维酸、美罗培南和阿米卡星的耐药率相对较低,分别为21.5%、13.8%、12.3%。3GC-RS菌株整体的多重耐药性较高,95.4%对5种以上药物耐药,最高对12种药物耐药,呈上升趋势。使用PCR方法耐药基因和毒力基因进行检测,耐药基因的检测结果中sul-2基因的检出率最高,为73.8%;其次是tet C(64.6%)、str A(60%)、aac(6`)-Ib(55.4%)、CTX-M-1(46.2%)、tet A(44.6%)、sul-1(43.1%)、CTX-M-9(41.5%)、sul-3(40%);aad A2、tet G、CMY-2基因的检出率相对较低,分别为30.8%、29.2%、23.1%;qnr S基因检出率最低,为4.6%;CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-25、tet B四个基因在所有菌株中都未检出。毒力基因的检测结果中Mgt C基因的检出率最高,达96.9%,其次是Avr A(87.7%)、Sip C(86.2%);Spv R(47.7%)、Spv C(47.7%)、Pef A(46.7%)、Sod C1(30.8%)检出率相对较低;Sop E基因检出率最低,只有1例携带。对65株3GC-RS菌株进行PFGE分型试验,其中64株均形成了清晰可辨识的指纹图谱,经过聚类分析构建出了3个主要亚群及41种PFGE谱型;挑选40株具有代表性的3GC-RS菌株进行MLST试验,共检出ST-17(n=20)、ST-516(n=13)、ST-19(n=6)和ST-463(n=1)共4种序列型。PFGE方法对不同采样时期获得的沙门菌有良好的聚类效果。
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