目的：明确热带假丝酵母菌对唑类药物的耐药机制。　　方法：连续3个月从上海市、安徽省、江苏省、河南省和广东省的6家三甲医院共收集了147株热带假丝酵母菌，利用微量肉汤稀释法测定氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑对热带假丝酵母菌的MIC值。采用REP-PCR和MLST技术对147株热带假丝酵母菌进行基因分型。选取所有耐药株和21株敏感株，分别从外排泵、氧化呼吸和药物作用靶酶的改变等方面进行耐药机制的研究。通过罗丹明6G外排实验和罗丹明123染色流式分析比较耐药株和敏感株外排泵和线粒体膜电位的差异，并利用real-time RT-PCR检测外排相关基因CDR1和MDR1、呼吸链上基因CYTb以及靶酶编码基因 ERG11的表达，同时通过液相色谱-质谱/质谱联用系统检测麦角固醇的含量。对ERG11基因全长进行扩增和测序，寻找突变位点。利用PRODIGE方法构建erg11Δ的酿酒假丝酵母菌，验证ERG11突变位点与唑类药物敏感性之间的关系。最后对同时分离自同一患者的对氟康唑敏感的白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌和热带假丝酵母菌进行氟康唑体外诱导，比较三种假丝酵母菌对氟康唑的耐药易感性和耐药机制。　　结果：147株热带假丝酵母菌中18株对氟康唑耐药，21株对伊曲康唑耐药，4株对伏立康唑耐药。其中，4株同时对氟康唑和伊曲康唑交叉耐药，另有4株对三种唑类药物均耐药。REP-PCR与MLST在热带假丝酵母菌的基因分型中分型结果一致。147株热带假丝酵母菌共产生A～H8种REP-PCR型，分别对应MLST的ST146、新型1、ST136、ST127、ST177、ST169、新型2和 ST117。与敏感组相比，耐药组的外排泵无明显增强作用，CDR1和MDR1基因的表达量也无显著增加。耐药组比敏感组摄入更多的罗丹明123（p<0.05），在加入呼吸抑制剂NaN3后平均荧光强度下降的程度也明显大于敏感组（p<0.05），但两者CYTb基因的表达量没有显著差异。耐药组ERG11基因的表达水平明显高于敏感组，并且耐药程度越严重，ERG11的表达水平以及麦角固醇生成的量越高。测序发现耐药株的 ERG11存在突变位点 Y132F和S154F，将克隆有ERG11mut的表达质粒转化入erg11Δ的酿酒假丝酵母菌，发现其对三种唑类药物的MIC值均增加。体外诱导结果显示，光滑假丝酵母菌最易在氟康唑诱导下变为耐药株，而三种酵母菌的耐药机制也不尽相同，其中热带假丝酵母菌体外诱导耐药株的ERG11基因表达显著增加。　　结论：热带假丝酵母菌唑类耐药株的外排泵作用无增强，氧化呼吸不存在缺陷，其对唑类药物的耐药主要是由于ERG11基因的过度表达和突变引起的。