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目的:通过研究T淋巴细胞的肿瘤抑制作用,阐明中药方剂鳖龙软肝汤的主要成分苦杏仁苷在HBV相关性HCC以及HCC进展期间细胞免疫应答中的作用机制。方法:分别提取HBV相关HCC患者及健康对照者外周血中的T淋巴细胞,确定苦杏仁苷的最佳使用浓度;MTT检测健康人群外周血T细胞(NC-T)、HBV相关HCC患者外周血的T细胞(HBV-T)、苦杏仁苷处理的HBV-T细胞活性;ELISA检测各组细胞培养基中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-10的含量;流式细胞术检测各组细胞中CD4~+和CD8~+T细胞亚群占CD3~+T细胞的比值,以及CD4~+和CD8~+T细胞亚群内STAT3的磷酸化水平;QPCR和western blot检测各组细胞中STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2的表达;构建NC-T、HBV-T、苦杏仁苷干预的HBV-T细胞与HBV相关性肝癌HepG2.2.15直接共培养模型,ELISA检测培养基中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-10的含量;构建NC-T、HBV-T、苦杏仁苷干预的HBV-T细胞与HepG2.2.15非接触共培养模型,MTT检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、transwell检测细胞迁移和侵袭。结果:不同浓度苦杏仁苷处理72h时的NC-T细胞,选择10 mg/mL为苦杏仁苷的最佳处理浓度;HBV-T细胞活性减弱,苦杏仁苷可增强HBV-T细胞活性;HBV-T组培养基中IFN-γ、TNF-α、IL-2含量显著降低,IL-10含量显著升高;苦杏仁苷处理48 h后,IFN-γ、TNF-α、IL-2含量显著上调,而IL-10显著降低;HBV-T细胞中CD4~+亚群数量发生下调,CD8~+亚群上调,CD4~+/CD8~+的比值下降;苦杏仁苷可增强HBV-T细胞中CD4~+亚群数量,降低CD8~+亚群数,并上调CD4~+/CD8~+的比值。HBV-T细胞CD8~+亚群与CD4~+亚群中p-STAT3的MFI均显著高于NC-T细胞,苦杏仁苷干预后均发生下降;HBV-T细胞中STAT3和JAK2mRNA的表达显著升高,而苦杏仁苷干预后二者均下调;HBV-T组释放的IFN-γ、TNF-α、IL-2降低,IL-10则升高,苦杏仁苷干预后,HBV-T组IFN-γ、TNF-α、IL-2水平显著上调,IL-10则下调至NC-T组水平;HBV-T细胞对靶细胞HepG2.2.15的多种作用显著减弱,苦杏仁苷干预后,HBV-T细胞对靶细胞的作用显著增强。结论:1.苦杏仁苷可以提高HBV-T细胞活性。2.苦杏仁苷可通过JAK2-STAT3通路调控CD4+/CD8+T细胞,减弱HBV-T细胞受到的免疫抑制作用,增强细胞干扰和杀伤性细胞因子的分泌,增强对HBV相关HCC细胞活力、侵袭和迁移的抑制作用以及对凋亡的促进作用。