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植物内生真菌是指某一阶段或全部阶段生活于健康植物组织和器官内部的真菌,研究发现,部分内生真菌能合成与宿主相同或相似的活性成分,同时植物内生真菌具有种类多样、代谢产物丰富和分布广泛等特点,因而其成为筛选新型活性化合物的来源,在农业和医药等领域应用潜力巨大。本研究以药用植物金银忍冬为试验材料,进行了金银忍冬内生真菌分离及初步鉴定、抑菌菌株筛选、发酵工艺优化及抑菌菌株分子生物学鉴定等研究。研究取得的成果主要包括以下几方面:1、采用组织分离法从金银忍冬的根、枝条、叶、果实中共分离出内生真菌47株,从根中分离出4株,枝条中分离出13株,叶和果中各分离出15株。47株内生真菌有33株能够产生孢子,14株经孢子诱导后未产生孢子。通过形态学鉴定,33株产孢子的内生真菌属于2纲3目4科8属,其中镰孢属为优势属。2、采用菌块法对分离到的47株内生真菌进行抑菌效果的初步筛选,筛选出对1种以上病原细菌有抑菌作用的菌株15株。采用平板孔阱扩散法对15株初筛菌株进行进一步筛选,结果表明,分离自叶组织的Y6菌株有较强的抑菌效果。3、利用单因素试验对Y6菌株发酵的最佳碳源、氮源进行了研究,其最佳碳源为麦芽糖,最佳浓度为30g/L;最佳氮源为麸皮,最佳浓度为20g/L。利用Box-Behnken响应面试验对发酵条件进行了优化,发酵条件的最优组合为温度31.09℃、p H6.82、装液量124.78m L。用最佳条件与原始条件进行对比试验,结果表明,采用最佳条件的发酵液的抑菌圈直径与最大预测值接近,与原始发酵条件相比增长了11.35%。4、对菌株Y6的ITS序列进行分析,与Gen Bank中核酸序列进行对比,利用MEGA5.05构建系统发育树,结果显示,菌株Y6鉴定为球毛壳菌(Chaetomium globosum sp.)。