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目的 1、在血清血水平利用毛细管电泳技术建立一种自动化、高通量，精确的地中海贫血诊断方法，对等电聚焦毛细管电泳（capillary isoelectric focusing,CIEF）检测血红蛋白A2（Hb A2）含量做出用于筛查地中海贫血（地贫）携带者的方法学评价。 2、建立一种快速、操作简单、自动化的基于变性高效液相色谱技术并结合引物延伸技术（primer extension-denaturing high performance liquid chromatography（PE-OHPLC））的针对中国人群最常见的5种β-地中海贫血（β-地贫）基因型的基因诊断新方法。 方法 1、收集105名健康成人、93例经常规地贫筛查有阳性表型的连续临床样品。通过正常人样品分析比较CIEF测定Hb A2与Helena Spife combo电泳系统结果的一致性；通过比较样品内和样品间Hb A2的CIEF测定值的变异系数（CVs）评价该法的精确度和稳定性；通过分析阳性样品的基因型来评价CIEF检测地贫的准确性。 2、依据人类β珠蛋白基因序列设计可扩增包含目前已知中国人群所有β-地贫突变位点的引物。同时，根据中国人群中5个最常见的β-地贫突变位点[CDs41-42（-TCTT），IVS-2-654（C＞T），TATAbox-28（A＞G），CD17（A＞T）和CDs71-72（+A）]的位置及变性高效液相色谱在全变性条件下的分离特点设计5条延伸引物。利用PCR扩增得到检测靶序列片段，然后以纯化的靶序列片段为模板进行多重引物延伸反应，得到中国人β-地贫5个最常见突变类型的特异性延伸片段混合物，用全变性高效液相色谱分析延伸片段混合物，其分离图谱可鉴定出被检样本的基因型。 结果 1、用CIEF分析当地健康人的Hb A2正常参考值为3.59％～5.23％。CIEF结果与常规血红蛋白电泳结果具有良好的线性关系；以基 因分析为确诊标准，用CIEF检测Hb AZ含量，及结合红细胞指 数阳性测定值所筛查的87例a一地贫或p一地贫携带者、6例 成人血红蛋白E病例样品均被准确诊断，未见假阳性或假阴性 结果。 2、将PE一DHPLC法用于120例中国人非家系p一地贫样品的基因诊 断和36个家系的p一地贫产前基因诊断。盲法分析结果显示， 120例非家系p一地贫样品的引物延伸变性高效液相色谱与反 向点杂交（Reverse dot b10t，RDB）法的检测结果的符合率为 100%（120/120）。产前诊断中108例不同基因型样品的PE一DHPLC 法与RDB法检测结果的符合率亦为100%，其中包括6例RDB法 诊断为上述5个常见突变以外的其他类型突变，故该法对108 个样品的突变检出率为94.4%（102/1 08），对36个中国南方p- 地贫产前诊断家庭的可诊断率为97.2%（35/36）。结论 1、等电聚焦毛细管电泳是一种快速高效、高稳定性、高精确度的 Hb AZ测定方法，可用作地贫携带者的常规筛查手段。 2、PE一DHPLC法是一种准确、高效的p一地贫突变分析方法，可用 于p一地贫的常规基因诊断及产前基因诊断。