膀胱癌患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的检测及临床意义

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背景及目的:近年来,随着全球工业化的进展及人类寿命的延长,膀胱癌在世界范围内发病率及患病率明显升高,居所有恶性肿瘤的第十一位,并已逐渐成为人们所重视的健康问题。膀胱癌根据病理类型及临床分期差异,采取个体化的治疗措施,其中包括主要的手术治疗、术后辅助膀胱灌注化疗等。但术后高复发率仍是膀胱癌患者面临的困境,这也一直是外科医生关注的问题。近年来,关于肿瘤的免疫治疗已经成为医学的热点话题,多数研究报道肿瘤的发生机制是机体免疫功能的降低所致。而在肿瘤的相关免疫中调节性T细胞(Treg)是非常关键的因素,既往的许多研究表明,在肺癌、胃肠道恶性肿瘤、肝癌、卵巢癌等实体肿瘤及血液恶性肿瘤中Treg细胞较健康对照组是明显升高的。然而关于Treg在膀胱癌方面报道非常少。本研究主要是通过检测膀胱癌患者外周静脉血CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞水平,探讨其与膀胱癌的关系,并进一步研究手术联合表柔比星膀胱腔内局部灌注化疗对膀胱癌病人外周血CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞水平的影响,从而为患者判断预后和治疗策略带来新的理念。材料和方法:采集2014年2月-2015年1月就诊于南昌大学二附院70例膀胱癌患者以下各个时期外周静脉血(男性56例,女性14例,非肌层浸润性60例,肌层浸润性10例;非肌层浸润性包括:原发41例,复发19例;原发非肌层浸润中病理低级别29例,病理高级别12例):手术前1天,术后联合表柔比星行即刻膀胱灌注化疗后第1天、1周、1月,仅行手术组术后第1天、1周;同时抽取20例健康体检者作为对照组。使用三色免疫荧光标记法及流式细胞术(FCM)检测CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T细胞比率。结果:1、膀胱癌病人外周静脉血CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T淋巴细胞比率(12.36±2.74%)较健康对照组(5.34±1.31%)显著升高,P<0.01;膀胱癌病人外周静脉血CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T淋巴细胞比率:男性(12.53±2.24%)与女性(11.97±1.93%)比较无明显差异,P>0.05;年龄>60岁(12.49±2.21%)与≤60(12.05±1.88%)岁比较无明显差异,P>0.05。2、肌层浸润性膀胱癌病人外周静脉血CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T细胞比率(13.17±2.92%)较非肌层浸润性膀胱癌病人(10.66±1.86%)明显升高,P<0.05;非肌层浸润膀胱癌病人静脉血CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T细胞比率:复发患者(11.81±2.07%)较原发(9.30±1.81%)明显增多,P<0.01;原发中病理高级别者(10.52±2.01%)较低级别者(8.78±1.39%)升高,P<0.05。3、非肌层浸润性膀胱癌病人手术后联合即刻(术后24小时内)表柔比星膀胱灌注化疗组第1天(8.54±1.27%)、1周(8.2±1.41%)、1月(7.04±1.56%)外周静脉血中CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T细胞比率较术前1天(12.30±2.31%)均明显降低,P<0.01;术后1月较术后1天、1周降低更明显,P<0.05;仅行手术组术后第1天、1周较术前1天降低明显,P<0.05;两组手术的各自术后第1天与1周比较无明显差异,P>0.05;术后联合即刻表柔比星膀胱灌注组第1天、1周分别较仅行手术组术后第1天(9.88±1.43%)、1周(9.53±1.52%)降低明显,P<0.05。结论:1、膀胱癌患者外周静脉血CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T细胞比率较健康对照组显著升高,表明机体抗肿瘤免疫应答功能受损,对肿瘤的发生形成耐受;性别及年龄不是膀胱癌患者抗肿瘤免疫影响因素。2、膀胱癌患者外周血CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T细胞比率越高,肿瘤倾向于容易复发及向肌层浸润进展,病理分级越高,总体预后更差。3、手术联合表柔比星膀胱灌注化疗可以明显降低非肌层浸润性膀胱癌患者外周静脉血CD4+CD25+CD127low/-Treg/CD4+T细胞比率,机体抗肿瘤免疫功能有所恢复,可以降低肿瘤复发及浸润进展,在免疫学方面,两者联合应用于临床是非肌层浸润性膀胱癌一种有效治疗方法。
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