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有机磷农药的广泛使用造成了严重的环境问题,并已对人类健康带来潜在危害。有机磷农药残留的去除尤为重要,有机磷农药降解微生物及其产生的降解酶是消除有机磷农药污染的有效、安全的方法,最具应用前景。从有机磷农药污染的土壤中分离得到的三株有机磷农药降解菌:JMUPMD-1,JMUPMD-2,JMUPMD-3,利用形态观察、生理生化实验和rDNA ITS序列分析分别对三株菌进行鉴定。对JMUPMD-3菌株产有机磷农药解酶进行摇瓶培养优化,根据优化结果进行7 L罐发酵,对菌株的发酵动力学进行分析。JMUPMD-1的rDNA ITS序列与布朗克假丝酵母(Candida blankii)的同源性为99%,形态特征和生理生化特性与布朗克假丝酵母相符合,因此鉴定为布朗克假丝酵母。JMUPMD-2 rDNA ITS序列与米曲霉(Aspergillus oryzae)的同源性为99%,菌落形态和显微形态都与米曲霉特征相符,鉴定为米曲霉。JMUPMD-3的rDNA ITS序列与黄蓝状菌(Talaromyces flavus)同源性为99%,形态特征与黄蓝状菌基本符合,鉴定为黄蓝状菌(无性世代为Penicillium vermiculatum Dangeard)。三株菌产生的甲基对硫磷(Parathion-methyl,PM)降解酶均属于胞内酶,其中,T. flavus JMUPMD-3的产酶能力最强。摇瓶优化后的培养基及培养条件为:蔗糖19.0 g/L,酵母膏3.2 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,KCl 0.5 g/L,FeSO4·7H2O 0.018 g/L,Triton X-100 2% (v/v),甲基对硫磷乳油0.2% (v/v),发酵液初始pH 8.0,培养温度24℃。用初始培养基在7 L罐中发酵T. flavus JMUPMD-3,PM降解酶活力最高为46.1 U/L,采用优化的培养基和培养条件发酵,PM降解酶活力最高为127.1 U/L,比第一批提高了183%。在第二批7 L罐发酵基础上,取消Triton X-100添加,并维持发酵过程培养基的pH为6.0,生物量提高3.2 g/L,最高酶活力水平持平,但稳定期延迟。动力学分析表明,菌株对数生长期的24 h?56 h,PM降解酶的合成与菌体的生长相偶联,PM降解酶的合成与PM的消耗有关,而PM的消耗不受酶产生的影响。PM降解酶对敌敌畏也有良好降解作用,可能属于广谱性有机磷农药降解酶。分离到三株有机磷农药降解真菌:Candida blankii,Aspergillus oryzae,Talaromyces flavus,其中Candida blankii和Talaromyces flavus降解有机磷农药的报道较少,增加了新的有机磷农药降解真菌资源。对T. flavus JMUPMD-3产PM降解酶进行了摇瓶优化和7 L罐发酵初试,为进一步提高菌株产PM降解酶活力奠定了基础。