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p53基因作为重要的肿瘤抑制因子,与肿瘤的发生密切相关。在近半数肿瘤细胞中,p53基因发生变异,造成p53失活,在另外近半数肿瘤细胞中,野生型p53活性受到过量表达的负调控因子Mdm2（Murine Double Minute 2）和MdmX（Murine Double Minute X）的抑制。设计有效的小分子抑制剂靶向p53-Mdm2/MdmX蛋白质相互作用位点,解除Mdm2和MdmX对p53的抑制作用具有重要的临床意义。Mdm2和MdmX作为同源蛋白,两者的氨基酸序列和三维结构高度相似,尽管已有多种Mdm2抑制剂进入不同阶段的临床研究,但具有临床研究潜力的MdmX抑制剂依然没有取得很大突破,其原由在于Mdm2高亲和力小分子抑制剂对MdmX的抑制效果甚弱或者形成共价结合,毒副作用大,因此,需要新策略筛选新型MdmX抑制剂,寻找新型的潜在结构骨架或药效团。本研究利用p53转录激活结构域（p53p）中唯一存在的在与Mdm2/MdmX相互作用起关键作用的色氨酸的内源荧光为探针,将p53p通过一段柔性的氨基酸序列与MdmX的p53结合结构域（N-MdmX）连接起来,构建了一种新型的融合蛋白模型（p53p-N-MdmX）,通过nutlin-3a和其他32个Mdm2抑制剂评价了该模型的可行性。实验室前期研究结果发现p53p中的另外两个关键氨基酸的结合位点（F19和L26）与色氨酸结合位点（W23）存在协同效应,为了筛选到与F19或L26结合口袋具有协同效应的片段化合物并用于改造现有MdmX抑制剂,分别将融合蛋白p53p片段上的另外两个关键氨基酸Phe19和Leu26突变为Ala,构建出两个新型的模型(p53pF19A-N-MdmX及p53pL26A-N-MdmX)。利用p53pF19A-N-MdmX融合蛋白模型筛选包含nutlin-3a和32个Mdm2抑制剂的小分子化合物库时发现苯并二氮卓化合物基团与F19结合口袋具有协同效应,基于此基团,改造nutlin-3a的药效团,设计出一种新型的MdmX抑制剂（命名为H201）。研究结果表明,以融合蛋白筛选模型筛选小分子化合物库的方法是可行的,并成功运用模型筛选优化设计出MdmX小分子抑制剂H201,它作为一种有潜力的候选药物,具有良好的应用前景。这种通过建立融合蛋白筛选模型筛选抑制剂的策略以后也能够应用到其它重要蛋白的药物筛选和设计。