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目的:NK/T细胞淋巴瘤(NK/TCL)是一种高度侵袭性血液系统恶性肿瘤,在中国人群中相对高发。现有治疗方案下,仍有部分NK/TCL患者治疗反应不佳,迫切需要新的治疗手段。新近发现阻断免疫检查点的治疗如PD-1抗体对NKT/CL有显著活性,提示免疫治疗可能是一个重要的发展方向。本研究观察另一免疫检查点分子TIM3在NK/TCL的表达,及其配体对NK/TCL的生物学效应。方法:Western-blot测定NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6、SNT-8和健康人外周血NK细胞中TIM-3的表达;采用不同浓度重组人galectin-9(rhGAL-9)作用于NK/TCL细胞株24h后,通过CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡;Western-blot检测caspase-3、PARP及其剪接体和MAPK信号通路蛋白磷酸化表达水平变化。结果:NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6和SNT-8的TIM-3表达较健康人外周血NK细胞显著增高,分别是健康人外周血NK细胞的3.13±0.04、2.77±0.64和3.3±1.04倍;CCK-8检测结果显示,rhGAL-9浓度为1.0μg/mL时,SNK-1、SNK-6细胞株细胞存活率略有下降,分别为(87.58±7.97)%、(89.21±5.702)%,SNT-8细胞株略有升高,为(105.86±5.02)%。当rhGAL-9浓度为2.5μg/mL时,SNK-1、SNK-6和SNT-8三株细胞存活率均下降,分别为(49.80±7.91)%、(74.09±9.04)%和(36.05±4.64)%。当rhGAL-9浓度提高至5.0μg/mL时,三株细胞存活率进一步下降至(25.70±5.70)%、(31.33±9.22)%和(19.24±4.96)%。上述结果提示,rhGAL-9能够抑制NK/TCL细胞株细胞活力,并具有浓度依赖性。流式细胞术检测显示SNK-1、SNK-6和SNT-8细胞株对照组凋亡率为(4.43±0.70)%、(4.67±0.43)%和(4.07±1.20)%,1.0μg/mL rhGAL-9实验组为(26.07±1.75)%、(14.57±1.15)%和(4.03±1.35)%,2.5μg/mL rhGAL-9实验组中,三株细胞凋亡率明显增加,分别为(58.57±2.15)%,(42.43±0.69)%和(76.07±6.97)%。上述结果提示rhGAL-9可诱导NK/TCL细胞株凋亡,并具有浓度依赖性,组间差异具有统计学显著性;Western-blot结果显示,caspase-3和PARP剪切蛋白(cleaved-caspase-3和cleaved-PARP)表达水平随rhGAL-9剂量增加而升高,当rhGal-9浓度为1.0μg/mL时,SNK-1、SNK-6和SNT-8三株细胞cleaved-caspase-3表达量分别是对照组(Con)的2.26±0.33、2.31±0.24、2.85±0.38倍,cleaved-PARP表达量分别是对照组的3.46±0.86、1.20±0.57、2.18±0.77倍,当rhGal-9浓度为2.5μg/mL时,cleaved-caspase-3表达量分别是对照组的2.28±0.20、2.33±0.07、3.82±0.48倍,cleaved-PARP表达量3.72±0.69、1.43±0.67、3.45±1.07倍;rhGal-9作用15min时,SNK-1、SNK-6和SNT-8三种细胞株JNK蛋白磷酸化水平均明显增加,分别为对照组的2.0±0.2、1.99±0.38和2.54±0.23倍。结论:TIM-3在NK/TCL细胞株中存在异常的高表达,,其配体galectin-9可显著诱导细胞凋亡,机制可能与JNK磷酸化水平升高相关。