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吉非替尼的获得性耐药是导致肺癌靶向治疗失败,患者预后差、死亡率高的主要原因之一。目前所能预测吉非替尼耐药的分子标记物匮乏且单一。外泌体作为细胞间传递信号的囊泡,随着研究的不断深入,发现其在肿瘤发生发展、侵袭转移和耐药等方面发挥着重要作用。目的本实验通过对人肺腺癌细胞株（PC9）和人肺腺癌吉非替尼耐药株（PC9R）来源的外泌体进行circ RNA高通量差异表达分析,寻找出新的潜在预测耐药的分子标记物。方法收集PC9和PC9R细胞上清液,并且进行外泌体提取、观察与鉴定;通过高通量测序建立了外泌体中环状RNA（circ RNA）差异表达谱;挑选出差异表达最显著的目标circ RNA;收集吉非替尼敏感的肺腺癌患者及吉非替尼耐药患者外周血,运用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）验证外周血外泌体中目标circ RNA表达,再运用数据库、R语言对该circ RNA下游mi RNA和靶基因预测并且进行通路富集分析,进一步探究外泌体circ RNA参与吉非替尼耐药的分子网络。结果1.我们分离出PC9和PC9R细胞上清液中的胞外颗粒。透射电镜下,外泌体外形呈类圆形;粒径检测仪结果显示直径均值在30-150nm;外泌体标志蛋白CD9、CD63、TSG101高水平表达,证实外泌体分离成功。2.高通量测序结果显示,PC9R和PC9细胞相比,外泌体中circ RNA表达具有显著性差异（P<0.05）。其中35个circ RNA表达上调明显,341个circ RNA表达下调明显。经过进一步分析筛选出下调显著的目标RNA:circ KIF20B015。3.10例临床样本q RT-PCR验证外泌体circ KIF20B015在耐药患者血清样本中下调显著,与测序结果一致。4.生物信息学分析发现外泌体circ KIF20B015的母本基因KIF20B与肿瘤生物学活动相关,预测的下游靶基因与遗传物质转录调控、神经激素调节等基础生物学活动相关,与Hippo信号通路相关。结论1.CircRNA在PC9R和PC9细胞上清外泌体中差异表达。2.外泌体circ KIF20B015在耐药患者血清外泌体中下调显著。3.外泌体circ KIF20B015可能通过下游靶基因调控肺腺癌细胞对吉非替尼的药物抵抗,该分子可能成为检测肺腺癌靶向药物耐药的新的潜在生物标记物。