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十二卷属(Haworthia)植物是一类具有极佳观赏价值和极高经济效益的小型多肉植物,但是由于其生长缓慢且自然繁殖率低,因此,采用组织培养技术对十二卷属植物进行繁育具有重要意义。本研究以’金子’万象(Haworthia maughanii’Gold’)、’奈良’ 玉扇(Haworthia trunceat ’Nara’)、’阿房宫’寿(Haworthia comptoniana’Aboukyuu’)和 ’OB-1 ’ 玉露(Haworthia cooperi ’OB-1’)这 4 种十二卷属植物为供试材料进行组织培养研究,构建再生体系。并在此基础上,利用甲基磺酸乙酯(EMS)诱导斑锦变异植株,利用秋水仙素诱导多倍体植株。主要研究结果如下:1、无菌播种。用2%NaClO溶液浸泡’ OB-1’玉露种子20min时,污染率(5.60%)显著低于其他处理,发芽率(71.2%)介于其他两组处理之间,最终成活率(62.40%)显著高于其他处理。2、愈伤组织的诱导。对4种十二卷属植物的叶片薄层进行愈伤组织的诱导,研究发现黑暗条件下的诱导率显著高于光照条件。’金子’万象和’阿房宫’寿诱导愈伤组织的激素最优配比均为6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L,’奈良’玉扇的激素最优配比为6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT1.0mg/L,’OB-1’玉露的激素最优配比为 6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L。对’阿房宫’寿和’OB-1’玉露的叶块进行愈伤组织的诱导,’阿房宫’寿的激素最优配比为6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L,’OB-1’玉露的激素最优配比为6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L。通过对’阿房宫’寿和’OB-1’玉露叶片愈伤组织的诱导,发现不同部位的诱导率由高到低均为:叶基>中间叶块>中间薄层>叶窗。3、不定芽的分化。’金子’万象愈伤组织的最佳分化培养基配方为MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L,此时的分化率为71.67%,显著高于其他处理。在此培养基配方中,’奈良’玉扇、’阿房宫’寿和’OB-1’玉露均能正常分化产生不定芽,分化率在50%以上。4、生根和移栽。’金子’ 万象不定芽的最佳生根培养基配方为1/2MS+AC1.0g/L+NAA0.2mg/L,此时的生根率为98.61%,平均生根数为3.69条,平均根长为2.32cm,均显著高于其他处理。在此培养基配方中,’奈良’玉扇、’阿房宫’寿和’OB-1’玉露均能正常生根,平均生根率均在90%以上。移栽后,4种十二卷在赤玉土:蛭石=1:1栽培基质中成活率(>95%)均最高。5、EMS诱变育种研究。’阿房宫’寿愈伤组织存活率和分化率随浓度和时间的增大而降低,且浓度和时间对存活率和分化率均有极显著影响。其中0.4%EMS+2h为最佳诱变处理,共计得到15株斑锦变异植株。利用该处理对4种十二卷的愈伤组织进行大量诱变,其中’阿房宫’寿和’金子’万象共计得到29株斑锦变异植株,带锦的玉露叶片和带锦的玉扇叶片共计得到78株斑锦变异植株。6、多倍体育种研究。通过4种方式对’金子’万象进行秋水仙素诱导,其中愈伤组织浸泡法得到1 18株多倍体,愈伤组织混培法得到12株多倍体,叶片浸泡法未得到多倍体植株,叶片混培法得到11株多倍体。对’金子’万象多倍体进行形态、气孔和染色体观测发现,多倍体在株高冠幅比和叶窗面积上与二倍体具有显著差异,且其下表皮气孔变大,密度减小,四倍体染色体数目为2n=4x=28。