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瞬时受体电位锚蛋白离子通道1(Transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1)是瞬时受体电位(Transient receptor potential,TRP)超家族的成员之一。TRPA1不仅是主要的痛觉及冷觉感受器,同时也能感受细胞外刺激物刺激,机械刺激等。在痛觉,温度感知,炎症反应等生理功能中发挥了重要作用。尽管TRPA1广泛表达于各组织和器官中,但在淋巴细胞中的表达及功能研究还鲜有报道。溶血磷脂酰胆碱(Lysophosphatidylcholine,LPC)是哺乳动物体内重要的脂质分子,其是构成细胞膜及氧化脂蛋白的主要组成部分。当动脉粥样硬化发生时,机体内的磷脂酶A2(Phospholipase A2,PLA2)能催化细胞膜上的磷脂酰胆碱(Phosphatidylcholine,PC)及氧化脂蛋白产生LPC。LPC是重要的促炎以及促动脉粥样硬化脂质,能促进单核细胞的粘附,以及巨噬细胞向泡沫细胞转化。在内皮细胞中,LPC能促进线粒体活性氧(Mitochondrial reactive oxygen species,mtROS)的产生。在单核细胞及巨噬细胞中,LPC激活炎症小体并调控炎症因子的分泌。到目前为止,LPC受体研究主要集中在G蛋白偶联受体(Gprotein-coupled receptor,GPCRs)以及瞬时转运蛋白(TRP)受体通道家族,但LPC的具体受体及该受体调控的下游通路还不是很清楚。尽管早期研究发现一些GPCRs,如GPR4、G2A及GPR119等能参与LPC诱导的反应,但都无法证明它们间有直接作用关系。而TRP通道蛋白作为能感知外界刺激的受体,被发现参与LPC引起的钙离子内流等生理功能,是LPC受体研究的潜在目标。本课题的目的是验证TRPA1在人源单核细胞系THP-1分化的巨噬细胞中的功能性表达以及TRPA1参与调控LPC诱导的炎症反应。本课题使用实时定量PCR验证trpal的mRNA转录水平,使用western blotting及免疫荧光验证其蛋白表达水平及TRPA1在细胞上的分布情况,接着使用钙离子成像探究TRPA1调控钙离子内流的功能性作用。我们运用化学荧光检测探究了 TRPA1参与调节LPC诱导的mtROS生成及线粒体损伤;用酶联免疫反应(ELISA)探究了 TRPA1参与调节LPC诱导的IL-1β分泌变化;通过检测乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase,LDH)的释放量来检测TRPA1参与调节LPC诱导的细胞焦亡过程。实验结果表明TRPA1在THP-1分化的巨噬细胞中具有功能性表达。TRPA1参与调控LPC引起的钙离子内流,mtROS增加,线粒体膜电位降低,炎性因子IL-1β分泌以及细胞焦亡过程。这一结果说明TRPA1在巨噬细胞中具有重要的生理功能,并广泛参与LPC引起的炎症反应。这为以后探究TRPA1在巨噬细胞中的其它功能提供了参考。同时,也为以LPC受体为靶标的药物及抗体研发提供了研究依据。