布氏乳杆菌对断奶獭兔肠道菌群、TLR2和TLR4基因表达的影响

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ding_zh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着獭兔生产朝着规模化、集约化发展,腹泻已成为獭兔最主要的疾病之一,给獭兔养殖带来巨大经济损失。腹泻导致獭兔肠道菌群紊乱,肠道失去物理和生物的重要免疫屏障,Toll样受体(Toll-like Receptor,TLR)识别和清除微生物入侵的功能同时也遭到破坏,而益生菌作为生物制剂在防治獭兔腹泻方面有着巨大的潜力和天然的优势。因此,本研究就獭兔腹泻发生后盲肠菌群结构变化及断奶獭兔饲喂布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri,L.buchneri)后肠道菌群结构、TLR2和TLR4基因表达情况进行了研究,结果如下:1.应用PCR-DGGE和Quantitative PCR (qPCR)分析健康獭兔与腹泻獭兔盲肠菌群结构。结果显示,腹泻獭兔PCR-DGGE图谱与健康獭兔比较差异不显著(P>0.05),但香农指数(H’)、丰富度(Ea)、均匀度(S)腹泻獭兔均高于健康獭兔,聚类分析和主成分分析(Principal component analysis, PCA)能够将腹泻和健康獭兔区分为不同的簇。腹泻獭兔盲肠梭菌类群Ⅳ、梭菌类群XⅣa、白色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌和普拉梭杆菌等有益微生物数量显著降低(P<0.01),而埃希氏大肠杆菌数量却显著升高(P<0.05),其他菌属差异不显著。表明,獭兔腹泻发生后盲肠有益微生物数量降低,部分有害微生物数量升高;腹泻与健康獭兔菌群结构差异不显著,腹泻獭兔盲肠菌群结构有复杂化的趋势。2.日粮中添加1.0×104CFU·g-1和1.0×105CFU·g-1L.buchneri对断奶獭兔肠道菌群结构、TLR2和TLR4基因表达的影响。60只断奶獭兔(对照组、低剂量组和高剂量组)饲喂4周后,低剂量组獭兔体重总增重和日增重明显高于对照组和高剂量组(P<0.01),高剂量组与对照组比较差异不显著(P>0.05)。分别采用PCR-DGGE和qPCR比较各组肠道菌群结构、qPCR分析肠道中TLRs表达情况、ELISA方法检测外周血中细胞因子含量。结果显示,獭兔肠道菌群丰富度从十二指肠到盲肠呈“V”字形变化趋势,空肠丰富度最低:L.buchneri添加组肠道菌群香农指数(H’,十二指肠P<0.01、空肠P<0.01、盲肠P<0.05)、丰富度(Ea,十二指肠P<0.01、空肠P<0.01、盲肠P<0.05)、均匀度(S,十二指肠P<0.01、空肠P<0.01、盲肠P<0.05)显著增加,而回肠中H、Ea、S只有低剂量组显著增加(P<0.01),高剂量组差异不显著(P>0.05)。低剂量组和高剂量组獭兔空肠总菌(P<0.01)、厚壁菌门(P<0.01)、拟杆菌门(P<0.05)、肠杆菌科(P<0.01)、梭菌类群Ⅳ(P<0.05)和溶纤维丁酸弧菌(P<0.01)数量显著增加:回肠总菌(P<0.01)、厚壁菌门(P<0.05)、拟杆菌门(P<0.01)、梭菌类群Ⅳ(P<0.01)、浴纤维丁酸弧菌(P<0.05)和梭菌类群Ⅰ(P<0.01)数量显著增加,而肠杆科科数量显著降低(P<0.01)。此外,乳酸杆菌属(P<0.05)、双歧杆菌属(P<0.05)和产琥珀酸丝状杆菌(P<0.05)数量仅在高剂量组显著增加,低剂量组则无变化;盲肠中,L.buchneri添加组仅有肠杆菌科数量均显著降低(P<0.01),而高剂量组中乳酸杆菌属(P<0.05)、溶纤维丁酸弧菌(P<0.05)数量显著增加,其它检测菌属无变化。此外,进一步分析空肠、回肠和盲肠中E.coil,发现回肠和盲肠中布氏乳杆菌添加组E.coil数量显著降低(P<0.05),空肠也有降低但差异不显著(P>0.05)。由此可见,L.buchneri能够提高肠道微生物丰富度,增加肠道中多种有益微生物数量,抑制部分有害菌增殖。qPCR检测肠道TLRs基因表达,L.buchneri添加组与对照组比较,各肠段中TLRs基因表达量均出现降低。L.buchneri添加组,空肠和盲肠TLR2和TLR4基因表达显著降低(P<0.01);回肠TLR2和TLR4基因表达量,低剂量组均显著低于对照组(P<0.01),而高剂量组只有TLR4基因出现降低(P<0.05),TLR2基因表达差异不显著(P>0.05),说明L.buchneri具有下调肠道TLR2和TLR4的能力。L.buchneri添加组外周血中TNF-α显著升高(P<0.01),且高剂量组高于低剂量组(P<0.05)。IL-4在低剂量组和高剂量组均出现降低(P<0.05),且高剂量组低于低剂量组(P<0.05)。IL-1, IL-6和INF-y高剂量组与对照组比较显著降低(P<0.05),但低剂量组变化不显著(P>0.05)。IL-10和IL-12也有一定的变化但差异不显著(P>0.05)。结论:①獭兔腹泻发生后盲肠有益微生物数量减少,有害细菌数量增加:肠道菌群结构在一定程度上有复杂化的趋势:② L.buchneri能够增加肠道菌群丰富度,显著增加有益微生物数量,抑制部分有害细菌增殖;L.buchner能够提高肠道菌群B/F比例,适量添加L.buchneri有助于提高獭兔饲料利用率;.buchner能够下调肠道TLR2和TLR4基因表达,有助于提高肠道组织对正常菌群的耐受,适量提高外周血TNF-α含量。
其他文献
摘 要:随着经济和社会的发展,人们越来越重视生活质量的提高,于是以休闲、健康、时尚为特征的休闲体育,将成为人们追求更高生活质量的首选目标。由于休闲是新生事物,它的未来发展还不是十分明朗,但它迎合了时代特征,即以人为本,注重人的全面发展。我们由目前的休闲体育现状出发,运用逻辑分析法、文献资料法、归纳分析它的未来发展,以期为我国休闲体育的发展提供以一些有益的理论参考。  关键词:休闲体育 未来 发展
摘要:体育课是学校教学计划所规定的必修课,是学校体育的基本组织形式,是有计划、有组织、有目的地使学生掌握体育的科学知识和技能。不断发展和改善学生的素质及培养学生的思想品德教育与个性的过程。体育课的特点是按照一定的要求分班分组进行组织教学。上好体育课的基本特点,就是必须根据体育课的特点,充分发挥教师的主导作用和学生的主体作用,通过教与学的双边活动,及时对教学给予评价,得到反馈信息,及时对教学结果进行
胸膜肺炎放线杆菌是无芽孢多形性球状短杆菌,能引起猪呼吸系统疾病,具有高死亡和高传染等特点,临床上主要表现为肺部炎症和呼吸系统功能障碍,常呈暴发性流行,并常与多种细菌
在紧张激烈的篮球比赛中,特别是在比分交替上升、扣人心弦的关键时刻,恰到好处地把握比赛的节奏显得非常重要。本文就如何运用节奏的变化来控制比赛、培养运动员节奏意识进行
1 研究对象与方法    1.1研究对象  郑州大学体育学院2002、2003级篮球班160名学生为研究对象。  1.2研究方法  1.2.1文献资料法  在篮球课中以发现法进行教学,在训练前把所学习的动作要领有目的地提供给学生。根据现有知识,从准备活动时就采用学生自主发现、分组讨论、分组练习,然后结合教师的指导进行训练,调动学生自主训练的积极性,从而提高训练的水平和训练质量。并根据发现法使学生把
《中共中央国务院关于深化教育改革,全面推进素质教育的决定》指出:“全面推进素质教育,要坚持面向全体学生,为学生的全面发展创造相应的条件,依法保障学龄儿童和青少年学习的基本权利,尊重学生身心发展特点和教育规律,使学生生动活泼、积极主动地得到发展。”实施素质教育,就是全面贯彻党的教育方针,以提高国民素质为根本宗旨,以培养学生的创新精神和实践能力为重点,面向全体学生,充分发展学生个性,使学生全面发展,是
沙门氏菌(Salmonella)为肠杆菌科沙门氏菌属成员,是一类条件性细胞内寄生的革兰氏阴性肠杆菌,绝大多数可以对人和动物的健康造成威胁,主要引起发热、胃肠炎、腹泻和败血症等