Ginsenoside Rg1对脊神经损伤修复的促进作用及机制研究

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研究背景:脊神经损伤在脊柱外科非常常见。脊柱退行性疾病、外科手术操作及外伤等都可能对脊神经造成压迫、牵拉、挫伤等,造成不同程度的运动、感觉功能障碍,严重影响患者的生活质量。然而,脊神经损伤修复相关治疗的临床效果尚不理想,脊神经损伤仍然是临床面临的重大难题。脊神经损伤属于周围神经损伤的范畴。目前,中药及其提取物的相关研究是周围神经损伤修复领域中的热点之一。研究表明,自人参中提取的人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1, GRg1)对中枢神经系统损伤具有营养、保护及抑制神经元凋亡等作用。据此推测,GRg1的神经保护作用也有可能适用于周围神经系统。但是,目前GRg1的相关研究主要集中于脑保护方面,GRg1在周围神经损伤中的应用及机制研究很少。我们认为,将GRg1应用于周围神经损伤修复,有望提高周围神经损伤再生修复的治疗效果。研究目的:在大鼠周围神经损伤模型中研究GRg1对周围神经损伤的治疗效果。同时,在离体条件下针对GRg1对外周神经胶质细胞(雪旺细胞:Schwanncells, SCs)损伤条件下各种生物学行为的调控作用进行深入探索,以进一步揭示GRg1促进周围神经损伤后再生修复的可能机制。材料方法:1.制备SD大鼠坐骨神经挫裂伤模型,以不同剂量GRg1进行治疗(高/低剂量),同时设立甲钴胺对照组和生理盐水对照组,通过神经形态计量学指标、荧光金逆行标记、神经电生理检测、动物行为学指标(坐骨神经指数)以及靶器官形态学指标等评价大鼠神经再生修复、功能恢复及靶器官情况等。2.制备SCs氧化损伤模型,给予GRg1,并设立甲钴胺组、氧化损伤组和正常组作为对照。应用分光光度计测定丙二醛(malondialdehyde, MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)等指标以明确SCs脂质氧化损伤的情况,应用DAPI染色和MTT试验明确受损SCs增殖的情况,应用流式细胞仪明确受损SCs凋亡的情况,利用RT-PCR、Western blot及ELISA等技术明确受损SCs合成和分泌NGF、BDNF等神经营养因子的情况。结果:1.高剂量GRg1组的神经再生修复和功能恢复情况(神经形态计量学指标、荧光金逆行标记、神经电生理检测)明显优于其它组,坐骨神经指数和靶肌肉的形态等恢复良好,最为接近正常。2. GRg1组SCs的氧化损伤水平、细胞凋亡数量明显低于其他组,而其细胞增殖、细胞活力以及NGF、BDNF等神经营养因子的合成和分泌显著高于其他组。结论:GRg1可以有效促进周围神经损伤再生修复并加快神经功能的恢复。同时,GRg1可以显著降低受损SCs的氧化损伤水平,提高其增殖和细胞活力,抑制细胞凋亡,并促进NGF、BDNF等神经营养因子的合成和分泌。上述GRg1对损伤条件下SCs的调控作用可能是GRg1促进外周神经再生和神经功能恢复的机制之一。
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