蚕豆萎蔫病毒2号山西分离株的全基因组序列测定与分析

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青椒(Capsaicam annuum)为菊亚纲(Asteridae),茄科(Solanaceae)一年生或多年生草本植物,是我国深受人们喜爱的蔬菜之一。现如今,青椒的种植面积越来越大,使得其被病毒侵染的现象逐渐严峻,造成了农业经济的极大损失。本研究对山西太谷范村蔬菜种植基地具有典型病毒病症状的青椒病样进行了分子生物学检测以及鉴定,发现青椒被蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2, BBWV2)所侵染,并克隆了BBWV2的全基因组序列。依据生物学检测法,利用dsRNA、非序列依赖性PCR扩增(sequence-independent amplification, SIA)、RT-PCR对感病青椒进行了检测。结果发现侵染青椒的病毒为蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2, BBWV2),将青椒分离物命名为BBWV2-Ca。为了进一步明确青椒BBWV2-Ca的分类地位,对BBWV2-Ca的全基因组序列进行分段克隆、序列测定和分析。结果显示BBWV2-Ca具有蚕豆病毒属(Fabavirus)的典型特征,它是二分体病毒,包括RNA1和RNA2。RNA1全长5929nt,含有1个ORF。BBWV2-CaRNA1与BBWV2其它分离物的氨基酸同源性为86.8%-97.3%。系统进化显示,BBWV2-Ca RNA1与中国的BBWV2-XJ14-3以及韩国的BBWV2-RP3株系聚为一簇,同源性最高,而与西班牙的BBWV1-Ben株系同源性最低。BBWV2-Ca RNA2全长3559nt,含有1个ORF,编码三种蛋白,分别是运动蛋白(VP53/VP37),外壳蛋白大亚基(Large Coat Protein, LCP)和外壳蛋白小亚基(Small Coat Protein, SCP)。BBWV2-Ca RNA2与BBWV2其它分离物的氨基酸同源性为89.9%-97.1%。系统进化表明,BBWV2-Ca RNA2与来自中国的BBWV2-Am同源性最高,形成一个独立分支,而与来自西班牙的BBWV1-Ben株系同源性最低。
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