目的:脑血管病是威协人类健康的最严重疾病之一,无论儿童、青年或是中老年均可发病,它具有发病率高、死亡率高、致残率高、复发率高及并发症多的特点,己经严重影响了患者的生存状态和生活质量。长春西汀(vinpocetine)治疗脑梗塞、脑出血后遗症及脑动脉硬化症等多种类型的循环障碍性脑血管疾病效果显著,并可用于改善脑功能、增强记忆、改善情绪,延缓脑衰老,长期应用安全性和耐受性极高。长春西汀是一种吲哚类生物碱,因该药在水中溶解度极低,而且人体内肝脏细胞对长春西汀具有极强的代谢作用,其市售普通口服制剂存在严重的肝脏首过效应,生物利用度很低[1]。为了提高生物利用度和患者顺应性,本文研究制备了长春西汀壳聚糖微球鼻腔给药制剂,鼻腔给药具有方便,吸收迅速,起效快的优点,而且长春西汀的分子量为350.5,脂溶性较高,属于难溶性药物,给药剂量为10-15 mg/日,具有适宜的油水分配系(logKa/W=3.56),适宜黏膜给药。载体材料壳聚糖有良好的生物粘附性,可以延长药物与鼻黏膜的接触时间,促进药物吸收。方法:本文用壳聚糖微球的常用制备方法——乳化交联法制备了长春西汀壳聚糖微球,对处方进行单因素考察,并以微球粒径分布、载药量、包封率为综合评价指标,采用四因素三水平正交实验设计,确定最佳制备工艺。用光学显微镜和扫描电镜观察微球的外观形态,粒径大小和分布,探讨微球的成形机理。考察微球释放行为,并对按最佳处方得出的释药行为,进行释药模型拟合。黏膜粘附性及纤毛毒性考察:以在体蟾蜍上腭黏膜纤毛为动物模型,通过测定纤毛持续运动时间来评价长春西汀壳聚糖微球的纤毛毒性;通过测定纤毛输送速率来评价微球的黏膜黏附能力。稳定性实验:将最佳处方的长春西汀壳聚糖微球分别进行高温、高湿、强光条件下影响因素实验,进行微球初步稳定性研究。在室温下,密封放置6个月,测定微球外观、含量及释放度,考察其长期稳定性。体内药代动力学实验:选用大鼠为实验动物,分别采用长春西汀静脉注射、其壳聚糖微球鼻腔给药两种不同的给药途径进行体内药动学研究。采用高效液相色谱法测定血浆中药物浓度,采用脑组织匀浆法测定脑内药物含量,用3p97药代动力学程序软件处理数据,计算药代动力学参数,并用梯形法计算AUC0-∞。结合各给药途径药代动力学参数,分析长春西汀壳聚糖微球鼻腔给药的体内吸收过程。结果:通过对处方和制备工艺的单因素考察,发现壳聚糖浓度,搅拌速度和投药量,交联剂用量对微球的粒径,包封率,载药量影响较大,通过四因素三水平正交实验,筛选出长春西汀壳聚糖微球的优化制备工艺和处方。对按优化处方和工艺制备的三批微球进行考察,结果表明该制备工艺稳定,重现性良好。光学显微镜下观察微球外观圆整,粒径分布均匀,平均粒径为43.72±1.70μm,载药量为7.73±0.29%;使用扫描电镜观察到微球表面圆整,有少许药物晶体。体外释放研究结果表明:微球释药行为符合Higuchi模型,从释药曲线可以看出微球突释明显,有利于药物的鼻腔吸收。黏膜粘附性及纤毛毒性研究结果表明,壳聚糖微球的纤毛输送速率为与碳粒的基础输送速率相比显著降低,说明壳聚糖微球黏膜粘附性能良好。在体蟾蜍上颚给予壳聚糖微球后,纤毛持续摆动时间和生理盐水对照组和无纤毛毒性的盐酸伪麻黄碱组相比,持续摆动时间略有下降,但不影响其用于鼻腔给药。初步稳定性实验:在相对湿度92.5%条件下,第五天和第十天的吸湿增重均大于5%,而且颜色变深;相对湿度75%条件下,吸湿增重小于5%,颜色基本不变。在高温60℃条件下,微球释放度,含量,外观均无明显变化。但在强光4500±500 lx下,微球含量下降,应避光保存。长期实验将微球于室温下密封放置6个月期间,外观、含量、释药曲线均无显著变化。大鼠体内药物动力学研究:以大鼠为试验动物,分别尾静脉注射长春西汀注射液和鼻腔给予长春西汀壳聚糖微球,体内实验药物动力学结果表明,静脉注射给药后,血浆中vinpoctine分布动力学符合二室模型;鼻腔给药后,血浆中vinpoctine分布动力学符合单室模型;注射和鼻腔给药后脑组织中vinpoctine分布动力学都符合单室模型。从主要药动学参数可以看出鼻腔给药后血浆半衰期由0.80h延长至1.52h;脑组织内药物半衰期由1.48h延长至1.85h;绝对生物利用度达56.5%;血浆AUC(0-6h)为静脉注射的0.57倍,但脑组织AUC(0-6h)为静脉注射的1.08倍;鼻腔给药后DTI是静脉注射给药的1.89倍。本实验表明长春西汀壳聚糖微球鼻腔给药后吸收迅速,半衰期延长,生物利用度高,并具有一定的脑靶向性。结论:本课题采用“正交设计”法优化筛选确定的处方和制备工艺稳定可靠,重现性好,制备的微球符合鼻腔给药要求,体内外实验均表明壳聚糖微球延长了药物在鼻腔内的滞留时间,利于药物吸收。该制剂使用方便,生物利用度高,并具有一定的靶向性,将有很好的应用前景。