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目的:在临床上寻找慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)感染和机体免疫反应的依据,同时探讨RSV感染人正常支气管上皮细胞(Normal human bronchial epithelial cell,BEAS-2B)细胞所引起的免疫反应中,Toll样受体3/4(Toll like receptor 3/4,TLR3/4)在其中的作用。方法:收集正常人、慢性阻塞性肺疾病稳定期(Stable of chronic obstructive pulmonary disease,SCOPD)及慢性阻塞性肺疾病急性加重期(Acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者的痰液标本各30例,用巢式PCR法检测各组受试者痰液中RSV;用ELISA法检测各组受试者痰液中TNF-α,IL-13,IL-32及INF-β蛋白的表达;用RT-PCR检测受试者痰液中TLR3/4 mRNA的表达。培养人喉癌细胞(Hep-2),扩增RSV,使用RT-PCR验证RSV在Hep-2中的扩增及计算其病毒滴度;培养人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B),将不同组(空白组,紫外线灭活组,不同浓度组)的RSV感染BEAS-2B不同的时间(12h,24h,48h)后使用光学显微镜观察细胞的形态变化;使用ELISA检测细胞上清液中IFN-β,IL-13,IL-32和TNF-α蛋白的表达并使用RT-PCR检测RSV感染BEAS-2B细胞后TLR3/4 mRNA的表达。结果:30例正常人组痰液中未检出RSV,30例SCOPD组患者痰液中检出RSV3例,占10%,30例AECOPD组患者痰液中检出RSV8例,占26.6%。COPD患者中INF-β,IL-13,IL-32及TNF-α的蛋白表达水平均较正常人高(P<0.05)。COPD患者中RSV阳性组痰液中INF-β,IL-13,IL-32及TNF-α的蛋白表达水平均较RSV阴性组高(P<0.05)。COPD患者痰液中TLR3/4 mRNA水平较正常人高(P<0.05)。RSV阳性组痰液中TLR3/4 mRNA水平较RSV阴性组高(P<0.05)。RSV感染Hep-2细胞后,细胞由不规则多角性形变圆直至碎裂,脱落,即产生致细胞病变效应。在不同浓度的RSV感染BEAS-2B不同时间后,应用ELISA检测到RSV感染组中TNF-α,IL-13,IL-32及IFN-β蛋白的表达较对照组增加(P<0.05),RT-PCR检测RSV感染组中TLR3/4 mRNA的表达较对照组增加(P<0.05)。结论:RSV在慢性阻塞性肺疾病患者及BEAS-2B细胞中所引起的免疫应答,可能参与了COPD的发生与发展。