木脂素对MGC-803胃癌细胞抗增殖作用与细胞周期相关蛋白的相关性研究

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目的:研究木脂素对MGC-803胃癌细胞抗增殖作用与周期相关蛋白之间的相关性。方法:实验分为对照组和实验组,对照组:不加木脂素的MGC-803胃癌细胞;实验组:加不同浓度木脂素的MGC-803胃癌细胞,每组细胞分别培养24、48和72h。倒置显微镜观察MGC-803胃癌细胞生长情况,应用MTT方法检测对照组和实验组各时间段的细胞生存率,利用流式细胞技术检测木脂素对细胞周期的影响,采用免疫细胞化学检测p53、CDK2、cyclin E及cyclin D1蛋白的表达。结果:倒置显微镜观察结果,对照组MGC-803胃癌细胞增殖能力随培养时间的延长明显增强,而用木脂素处理的实验组MGC-803胃癌细胞增殖明显受抑制,细胞凋亡率明显增高。MTT检测结果,不同药物浓度(6.3、12.5、25、50、100μmol/L)的实验组在24h、48h、72h的生存率随药物浓度的增加逐渐降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.05),有浓度依赖性。利用流式细胞仪检测细胞周期结果,G1期细胞增多,S期及G2期细胞减少。免疫细胞化学染色结果,在24、48和72 h时对照组和实验组胃癌细胞p53蛋白的阳性表达率分别为86.6±2.9%,88.8±2.0%,89.9±3.1%和13.8±1.3%,15.3±0.8%,0.0±0.0%,各组间均有显著性差异(P<0.001);cyclin D1蛋白的阳性表达率分别为88.6±2.9%,89.0±3.4%,91.3±2.7%和13.2±1.9%,14.9±2.1%,0.0±0.0%,各组间均有显著性差异(P<0.001):CDK2蛋白的阳性表达率分别为78.9±3.1%,70.6±3.5%,71.2±3.3%和27.9±3.3%,20.5±2.1%,27.4±2.0%,各组间均有显著性差异(P<0.001);cyclin E蛋白的阳性表达率分别为87.7±2.4%,78.8±1.9%,78.4±2.7%和1.3±1.1%,1.7±0.5%,1.6±0.7%,各组间均有显著性差异(P<0.001)。结论:木脂素对MGC-803胃癌细胞具有明显的抗增殖作用,其机制之一与下调突变型p53、cyclin D1、CDK2、cyclin E蛋白的表达,从而阻止胃癌细胞从细胞周期G1期进入S期有关。
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