【摘 要】
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亚洲是世界梨栽培历史最长、产量最多的区域,我国也是梨最主要的起源地之一,现在生产上普遍栽培的白梨、砂梨、秋子梨和新疆梨等都原产于我国[1]。梨高度自交不亲和性的特性,
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亚洲是世界梨栽培历史最长、产量最多的区域,我国也是梨最主要的起源地之一,现在生产上普遍栽培的白梨、砂梨、秋子梨和新疆梨等都原产于我国[1]。梨高度自交不亲和性的特性,虽然有利于物种多样性,但这一特性限制了梨近亲繁殖,对梨这种以果实和种子为收获对象的作物来讲,自交不亲和性无疑增加了生产投入[2]。另一方面,梨自交不亲和性和童期长等特点延长了梨育种时间,可以通过以植物组织培养,离体组织再生及遗传转化技术,推动梨的种质创新和品种选育,是实现梨基因工程育种的有效方法。本实验通过对梨自交不亲和强度的探究,研究花粉管生长特性,结合坐果率,筛选出自交亲和性品种,一方面初步验证梨自交不亲和强度的判定方法,最终筛选出自交亲和性梨品种。另一方面以自交亲和性梨品种为材料,优化梨继代培养体系,建立围绕自交亲和梨品种的高效再生体系,为亲和性梨品种快繁,再生及之后的遗传转化研究提供理论依据和参考。主要研究结果总结如下:1.本试验对套袋处理的256个梨品种进行花粉管原位荧光显微观察,根据R值强度分析,有6个品种极有可能是自交亲和性品种,分别为‘闫庄鸭梨’、‘秋荣’、’54S-135’、’金坠梨’、‘大果黄花’、‘晚秀’。通过对不同R值的品种自花授粉结实率调查,发现‘晚秀’的坐果率为零,而‘金坠’和‘秋荣’坐果率都高于20%,其他自交亲和性强度为强与中的品种自花套袋不结实,或者结实率极低,为自交不亲和品种,验证了R值初步筛选自交亲和性品种方法的可靠性。2.本试验对筛选出的自交亲和品种进行初步培养,发现‘金坠梨’适合作为再生体系材料,通过对继代培养基中不同激素配比的筛选,发现适合‘金坠梨’的继代培养基为 MS+1.0 mg.L-1 6-BA+0.2 mg.L-1 IBA+30 g.L-1 蔗糖+7.5 g.L-1 琼脂,其芽平均增殖率为1.44个,此时褐化率最低。通过对不同基础培养基、不同激素种类及配比、叶片放置方式和暗处理时间的探究,发现适宜’金坠梨’叶片再生的培养基为NN69+2.0 mg.L-1 TDZ+0.4 mg.L-1 IBA,再生率达到100%,平均每叶再生芽数为2.11个,愈伤发生率达到100%,褐化率为0;远轴面朝下接种有利于提高叶片再生率;最适暗培养时间为21d。
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